HP-PRRSV GD株強弱毒株抗原在感染豬體內的動態(tài)分布研究.pdf

1、高致病性豬繁殖與呼吸綜合征(Highly pathogenic porcine reproductive andrespiratory syndrome,HP-PRRS)是由美洲型PRRSV高致病性變異毒株引起的一種急性高致死性疫病,自2006年爆發(fā)以來,給我國養(yǎng)殖業(yè)造成了非常嚴重的經濟損失。近年來,國內新爆發(fā)和流行的高致病性PRRS,主要以高熱、流產、高發(fā)病率和高死亡率為特征,是目前影響我國養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展最重要的疾病之一。
　　

2、目前,病毒基因亞型及血清型很多,同種但是不同致病力的病毒可以引起宿主靶細胞產生不同的應答反應。傳統(tǒng)滅活苗的保護力往往十分有限,不能達到預防HP-PRRSV的效果。而新型弱毒疫苗保護的毒株和豬場的毒株不一定能形成交叉保護,即使基因型差異很小,這是當前防控PRRS的最大難題。因此進一步研究開發(fā)新型PRRS疫苗并制定出更加合理的防控方案對我國養(yǎng)豬產業(yè)意義重大。
　　 本實驗通過比較幾株美洲株序列,選取ORF6和ORF7閱讀框內保守區(qū)域

3、,設計引物和探針,建立RT-PCR.方法和Taqman熒光定量PCR檢測方法,結果顯示特異性、敏感性均良好,熒光定量PCR方法比普通PCR方法敏感10-100倍作用。
　　 通過建立的RT-PCR方法和Taqman熒光定量檢測方法研究本實驗室培育的弱毒疫苗株GDr180株和強毒GD株F5代在感染40日齡仔豬后抗原在豬組織器官中的分布情況,以比較強弱毒株的組織嗜性差異,從而進一步揭示弱毒疫苗株的致病特性變化機理。結果顯示強弱毒株在

4、組織和器官中的分布情況差異顯著,分布范圍以及持續(xù)存留時間也有較大的不同。強毒株在第2周之前抗原分布范圍最廣,第2周之后分布范圍明顯減少；相對于強毒株而言,弱毒株感染后在組織中出現時間相對滯后,帶毒時間主要集中在第2周至第3周之間,在第5周完全消失。從分布范圍來看,強毒株的組織嗜性范圍較廣,而弱毒株僅限于肺臟及淋巴結等組織。說明強毒株在細胞傳代過程中毒力下降的同時,組織嗜性的范圍也明顯縮小,這可能是病毒與細胞的長期相互適應有關。