利用SCOTS技術(shù)篩選鴨疫里氏桿菌體內(nèi)外差異表達(dá)的基因.pdf

1、分類號(hào)密級(jí)華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文利用SCOTS技術(shù)篩選鴨疫里氏桿菌體內(nèi)外差異表達(dá)的基因IdentificationofGenesTranscribedbyRiemerellaana亦esdferinVivobySelectiveCaPtureofTranscribedSequences碩士研究生:鄭娟指導(dǎo)教師:李自力副教授指導(dǎo)小組:畢丁仁教授石德時(shí)副教授肖運(yùn)才副教授劉梅副教授胡思順副教授栗紹文副教授專業(yè):預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究方向:獸醫(yī)微生物

2、與免疫學(xué)獲得學(xué)位名稱:農(nóng)學(xué)碩士獲得學(xué)位時(shí)間:2008年6月華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院二00八年六月華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2008屆碩一論文8.4.3SCOTS技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)....................................................……，..........……12第二章鴨疫里氏桿菌基因組的提取、生物素標(biāo)一記以及165:DNA和235rDNA的克隆...............................

3、.............................................................................................……巧1研究的目的及意義............................................................................................……巧2材料與方法..............

4、...........................................................................................……巧2.1實(shí)驗(yàn)材料....................................................................................................……巧2.1.1菌株和工具酶.....

5、..……，.........................……，.....................................……巧2.1.2試劑..................................................................................................……巧2.1.3主要試劑及溶液的配制........................

6、.................................……，..……巧2.1.4本試驗(yàn)所采用的PCR引物............................................................……162.1.5主要儀器.........................................................................................

7、.……172.2試驗(yàn)方法...............................................……，.............................................……172.2.1RA一YM基因組的提取及標(biāo)記.............................................……，.....……172.2.2165rDNA的PCR擴(kuò)增...............

8、....................................................……182.2.3235rDNA的PCR擴(kuò)增...................................................................……192.2.4PCR產(chǎn)物回收與測(cè)序............................................................

9、.......……192.2.5PCR產(chǎn)物的克隆...........................................................................……202.2.6感受態(tài)細(xì)胞制備(氯化鈣法)......................................................……202.2.7質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化...............................

10、...……，.............................................……212.2.8質(zhì)粒的小量制備(堿裂解法提取質(zhì)粒)...................................……，二212.2.9重組質(zhì)粒的鑒定..............................................................................……212.2.1016

11、5rDNA和235rDNA的PCR擴(kuò)增結(jié)果分析.........................……222.2.n含165、235rDNA質(zhì)粒的RA基因組隨機(jī)標(biāo)記片段的制備..……，.223結(jié)果與分析..............................................……，...............................................……，…223.1RA一YM基因組.......

12、..........................一.......................................................……223.2165rDNA的PCR擴(kuò)增及酶切鑒定.........................................................……223.2.1165rDNA的PCR擴(kuò)增..................................

13、.................................……223.2.2165rDNA的酶切鑒定.....................................................................……233.3235rDNA的PCR擴(kuò)增(分三段擴(kuò)增)及酶切鑒定..........................……243.3.1235rDNA的PCR擴(kuò)增.................

14、.................……，..........................……243.3.2235rDNA的酶切鑒定.....................................................................……253.4RA基因組及rDNA質(zhì)粒的破碎...............................................……，........……26

15、4討論..............................................................................................……，...............……274.1RA基因組的提取及標(biāo)記..........................................................................……274.2PCR擴(kuò)增.