聯合應用IGF-1與bFGF對大鼠坐骨神經再生的實驗研究.pdf

1、背景以及目的：
　　 周圍神經缺損的修復是醫(yī)學上的難題之一。目前自體神經移植是治療周圍神經缺損的金標準，但仍存在供體缺乏、供體神經支配區(qū)功能障礙等缺陷。因此替代自體神經的載體成為現階段研究的熱點。甲殼素導管及其衍生物具有加速血管再生、促進內皮細胞生長、減少瘢痕形成等優(yōu)點，現已成為替代自體神經可靠的載體。但單獨應用甲殼素導管仍有局限性，它不能有效促進雪旺式細胞的分化及再生。胰島素樣生長因子(IGF-1)和堿性成纖維樣生長因子(bF

2、GF)不但能保護神經元并為神經系統(tǒng)發(fā)育提供營養(yǎng)，而且能促進雪旺細胞增殖，從而起到促進神經再生的作用。因此對周圍神經損傷的修復有一定作用。但以甲殼素導管為載體，聯合應用胰島素樣生長因子(IGF-1)和堿性成纖維樣生長因子(bFGF)修復周圍神經的研究尚未見報道。本實驗探討聯合應用IGF-1與bFGF對大鼠坐骨神經再生功能的影響，從而為探索治療周圍神經損傷新方法提供依據。
　　 實驗方法：
　　 健康雄性SD大鼠80只，隨機

3、分為5組，每組16只，制備雙側大鼠坐骨神經缺損模型（神經缺損10mm），以可吸收甲殼素神經導管橋接神經兩斷端形成神經再生室。A組為空白對照組組:神經再生室內注入等滲生理鹽水20μL,B組為對照組:神經再生室內注入明膠溶液20μL;C組為實驗組:神經再生室內注入IGF-1凝膠20μL;D組為實驗組:神經再生室內注入bFGF凝膠20μL;E組為實驗組（聯合用藥組）:神經再生室內注入IGF-1+bFGF凝膠20μL。術后4周、8周收集標本并觀

4、察再生神經的大體形態(tài)，檢測神經傳導速度，并進行特殊染色，S-100免疫組化檢測，使用統(tǒng)計軟件SPSS17.0進行統(tǒng)計學分析。
　　 實驗結果：
　　 1.4周后，肉眼可見各組神經缺損處已被新生組織填充，表面被大量的纖維組織包繞并有新生毛細血管，甲殼素導管內均有新生的組織，甲殼素導管未被完全吸收。8周后，肉眼觀可見神經缺損處纖維組織明顯減少，大量新生毛細血管，甲殼素導管基本被吸收并見其少量崩解碎片。
　　 2.神經

5、電生理檢測結果示:實驗組E組再生神經的傳導速度(4周:22.469±0.713，8周:28.095±1.163)優(yōu)于對照組(4周:11.418±0.519;8周:12.130±0.494)、空白對照組（4周:11.455±0.530;8周:11.936±0.755）、實驗組C組(4周:16.009±0.680，8周:22.097±0.673)、實驗組D組（4周:16.083±1.019，8周:22.618±0.863）。實驗組E組的再生

6、神經傳導速度明顯優(yōu)于其他各組，實驗組C組和D組再生神經傳導速度分別優(yōu)于對照組A組和空白對照組B組，其差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，對照組A組與空白對照組B組的再生神經傳導速度差別無統(tǒng)計學意義，實驗組C組和D組的再生神經傳導速度差別無統(tǒng)計學意義組間比較結果顯示(P＞0.0167)(組間多重比較行Bonferroni法檢驗，取校正=0.0167)。
　　 3.Loyez氏神經染色法（特殊染色）結果顯示:實驗組E組再生神經纖維數(

7、4周:22.469±0.713，8周:28.095±1.163)優(yōu)于對照組B組(4周:11.418±0.519;8周:12.130±0.494)、空白對照組A組(4周:11.455±0.530;8周:11.936±0.755)、實驗組C組（4周:16.009±0.680，8周:22.097±0.673）、實驗組D組（4周:16.083±1.019，8周:22.618±0.863）。實驗組E組的再生神經纖維數的平均值明顯高于其他各組，實驗

8、組C組與D組再生神經纖維數的平均值分別優(yōu)于對照組A組和空白對照組B組，其差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，對照組A組與空白對照組B組的再生神經纖維數的平均值差別無統(tǒng)計學意義，實驗組C組和D組的再生神經纖維陽性細胞數的平均值差別無統(tǒng)計學意義組間比較結果顯示(P＞0.0167)(組間多重比較行Bonferroni法檢驗，取校正=0.0167)。
　　 4.S-100免疫組化數據結果示:實驗組E組再生神經纖維陽性細胞數(4周:22.4

9、69±0.713，8周:28.095±1.163)優(yōu)于對照組B組（4周:11.418±0.519;8周:12.130±0.494）、空白對照組A組(4周:11.455±0.530;8周:11.936±0.755)、實驗組C組（4周:16.009±0.680，8周:22.097±0.673）、實驗組D組（4周:16.083±1.019，8周:22.618±0.863）。實驗組E組的再生神經纖維陽性細胞數的平均值明顯高于其他各組，實驗組C組

10、和D組再生神經纖維陽性細胞數的平均值分別優(yōu)于對照組A組和空白對照組B組，其差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，對照組A組與空白對照組B組的再生神經纖維陽性細胞數的平均值差別無統(tǒng)計學意義，實驗組C組和D組的再生神經纖維陽性細胞數的平均值差別無統(tǒng)計學意義組間比較結果顯示(P＞0.0167)(組間多重比較行Bonferroni法檢驗，取校正=0.0167)。
　　 結論：
　　 1.甲殼素導管中注入IGF-1凝膠能促進實驗性神經