鄭州地區(qū)醫(yī)院病人環(huán)孢子蟲病流行病學調(diào)查及分子遺傳特性初步研究.pdf

1、環(huán)孢子蟲（Cyclospora）為艾美球蟲科(Eimeriidae)環(huán)孢子蟲屬(Cyclospora)成員，在世界范圍內(nèi)流行傳播，具廣泛宿主。環(huán)孢子蟲為一種新近發(fā)現(xiàn)的腸道寄生原蟲，主要寄生于宿主小腸的上皮細胞，可引起宿主食欲減退、體重減輕、持續(xù)性腹瀉、腸痙攣及其它胃腸炎等臨床癥狀。免疫功能止常者感染環(huán)孢子蟲后主要引起白限性腹瀉，而對于免疫抑制者或免疫功能缺陷者，感染環(huán)孢子蟲后則可致持續(xù)性腹瀉甚至死亡。近年來，環(huán)孢子蟲病受到國內(nèi)外越來越多

2、研究人員的廣泛關注和重視。2008年7月劍2010年1月，采用福爾馬林-乙酸乙酯沉淀法、飽和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法對河南省鄭州地區(qū)3家醫(yī)院的病人進行環(huán)孢子蟲的感染情況進行調(diào)查，共發(fā)現(xiàn)環(huán)孢子蟲感染者29例。用PCR方法對其18SrRNA基因和ITS-1基因擴增，序列比對結(jié)果經(jīng)系統(tǒng)進化發(fā)育分析，所獲環(huán)孢子蟲蟲株均屬于卡耶塔環(huán)孢子蟲。
　　 本次試驗共調(diào)查5285名病人，總感染率為0.5％(29/5825)。其中，河南省人民醫(yī)

3、院、鄭州市兒童醫(yī)院和鄭州大學三附院病人環(huán)孢子蟲感染率分別為0.5%(22/4836)、0.5%(3/608)和1.0%(4/381):春季、夏季、秋季和冬季環(huán)孢子蟲感染率分別為0.0%(0/823)、1.0%(21/2017)、0.4%(8/1878)和0.0%(0/567)，表明環(huán)孢子蟲感染與季節(jié)具有明顯相關性(P＜0.01)；此次調(diào)查發(fā)現(xiàn)各個年齡段均發(fā)現(xiàn)有環(huán)孢子蟲感染，其中以0～17歲和60歲以上感染率較高，表明環(huán)孢子蟲感染與年齡具

4、有相關性(P＜0.05)；男性的環(huán)孢子蟲感染率為0.6%(19/3154)，女性的感染率為0.5%(10/2131)，表明環(huán)孢子蟲感染與性別無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。100倍光學顯微鏡下測量50個環(huán)孢子蟲卵囊，大小為7.5μm×7.5μm。
　　 基于18SrRNA基因和ITS-1基因?qū)?9個環(huán)孢子蟲陽性樣品進行巢式PCR擴增，對擴增出的29個環(huán)孢子蟲樣品的18SrRNA基因和7個環(huán)孢子蟲樣品的ITS-1基因進行測序，拼接比

5、對后的序列通過NCBI、EMBL和DDBJ三大分子生物學數(shù)據(jù)庫搜索同源序列，然后運用ClustalXl.81、Phylip3.64和DNAstar5.0等分子生物學軟件對所獲得的序列進行比對分析、構建分子進化樹?；?8SrRNA基因位點分析，結(jié)果表明29個人源環(huán)孢子蟲樣品與C.cayetanensis進化關系最為接近，僅存在兩個堿基差異。而根據(jù)在ITS-1基因位點種系進化分析，表明同一地理位置的分離株同源性較高。
　　 本研究