西地那非在大鼠單側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)復位后對側(cè)睪丸損傷中的作用.pdf

1、目的：本研究在已建立大鼠單側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)復位模型的基礎上，用藥物西地那非加以干預，對實驗不同時期的未扭轉(zhuǎn)側(cè)睪丸進行組織病理學的觀察，同時測定組織中NO/NOS含量、MDA水平，以及MHC肽-四聚體復合物流式細胞儀分析和TUNEL細胞凋亡測定，觀察大鼠單側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)復位后的不同時期內(nèi)，對側(cè)睪丸組織的損傷情況以及在西地那非干預下各項指標的變化。由此探討大鼠單側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)后對側(cè)睪丸生精功能的損傷機制以及西地那非的保護機理。
　　 方法：30日

2、齡健康雄性SD大鼠72只，隨機分成假手術組、安慰劑組、西地那非組3組，每組24只。假手術組僅將左側(cè)睪丸游離后再縫于陰囊壁固定，4小時后還納睪丸術畢。安慰劑組即左側(cè)睪丸順時針扭轉(zhuǎn)720°，維持4h后松解復位固定于陰囊內(nèi)。術畢按0.7mg/kg的量組內(nèi)每一只大鼠腹腔內(nèi)注入生理鹽水。西地那非組手術操作同安慰劑組，術畢按0.7mg/kg的量腹腔注射西地那非溶劑。分別在術后4小時、24小時、2周，每組各處死8只大鼠，取睪丸組織，分別進行以下指標的

3、測定：右側(cè)睪丸組織病理學觀察；右側(cè)睪丸組織中NO/NOS含量；右側(cè)睪丸組織中MDA水平；流式細胞儀測定右側(cè)睪丸組織MHC肽-四聚體復合物；右側(cè)睪丸組織TUNEL細胞凋亡測定。
　　 結(jié)果：1．術后4小時，各組間睪丸組織病理學變化無明顯差異，NOS含量未見明顯升高，但MDA含量在安慰劑組與西地那非組較假手術組已有顯著升高(P＜0.05)，同時兩組間也存在差異(P＜0.05)，NO在西地那非組較假手術組、安慰劑組明顯增加

4、5)。
　　 2.術后24小時，假手術組右側(cè)睪丸組織病理未見損傷，西地那非組損傷較嚴重，安慰劑組則最為嚴重。與假手術組相比，其余兩組NO/NOS含量、MDA含量、MHC肽-四聚體復合物表達明顯升高(P＜0.05)，細胞凋亡明顯增多(P＜0.05)。而西地那非組與安慰劑組相比，其在MDA、NO/NOS含量、MHC肽-四聚體復合物表達上明顯下降(P＜0.05)，細胞凋亡明顯減少(P＜0.05)。
　　 3．術后2周，假手術組

5、右側(cè)睪丸組織病理未見損傷，其余兩組組織損傷有不同程度恢復，但仍以安慰劑組最為嚴重。安慰劑組與西地那非組NO/NOS含量、MDA含量已降至與假手術組無明顯差異，但MHC肽-四聚體復合物表達仍較假手術組高(P＜0.05)，細胞凋亡仍存在(P＜0.05)。但與術后24小時相比有下降或減少。而西地那非組與安慰劑組相比，其在MHC肽-四聚體復合物表達上低(P＜0.05)，細胞凋亡較少(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：1．大鼠左側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)后，

6、右側(cè)睪丸組織損傷，主要表現(xiàn)為組織病理學上的改變，如：局部組織出血水腫、炎癥細胞浸潤、上皮細胞排列紊亂、曲細精管結(jié)構變形、生精上皮層數(shù)減少、平均曲細精管直徑減小、細胞空泡樣變性等。
　　 2．大鼠左側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)復位后4小時，右側(cè)睪丸已出現(xiàn)缺血再灌注損傷的表現(xiàn)，
　　 3．大鼠左側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)復位24小時，右睪丸組織已出現(xiàn)明顯的組織病理損傷改變，同時，右睪丸缺血再灌注損傷達到高峰，生精功能受到影響。部分損傷持續(xù)到2周后。
　

7、　 4.早期應用西地那非能減少組織MDA含量，減輕缺血再灌注損傷。先使組織NO處于稍高的水平，擴血管作用加強，拮抗交感神經(jīng)縮血管，避免組織損害→NOS激活→NO升高→組織損害的惡性循環(huán)，然后降低NO/NOS含量，減輕組織損傷，進而保護對側(cè)睪丸。
　　 5．早期應用適量西地那非，MHC肽-四聚體復合物表達較對照組少，減少T淋巴細胞介導的細胞免疫反應的發(fā)生，對自身免疫性交感性睪丸炎的機制形成有一定抑制作用，從而減少交感性睪丸炎的發(fā)