肝臟泡型包蟲病患者外周血中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及IL--35表達(dá)水平的研究.pdf

1、目的：肝臟泡型包蟲病(Hepatic alveolar echinococcosis，HAE)是一種由泡狀棘球蚴(Echinococcus alveolaris，Ea)感染導(dǎo)致的人獸共患的寄生蟲病，主要流行于我國西部牧區(qū)。泡狀棘球蚴感染人體后能夠誘導(dǎo)機(jī)體免疫調(diào)節(jié)系統(tǒng)，促進(jìn)人體對(duì)其產(chǎn)生免疫耐受以利于蟲體在人體內(nèi)長期寄生。機(jī)體被誘導(dǎo)產(chǎn)生免疫耐受的機(jī)制是由輔助性T細(xì)胞(helper T cells，Th)和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory

2、T cells，Treg)等多種效應(yīng)細(xì)胞共同參與的復(fù)雜免疫調(diào)控系統(tǒng)，在宿主體內(nèi)分別形成促進(jìn)寄生蟲死亡的炎癥反應(yīng)和促進(jìn)宿主對(duì)寄生蟲形成免疫耐受的免疫抑制的作用，兩股力量互相牽制權(quán)衡，最終導(dǎo)致了肝臟泡型包蟲病的慢性感染病程。這一機(jī)制中，Th17/Treg平衡在免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)中具有重要的作用，Th17細(xì)胞主要以促進(jìn)棘球蚴死亡的炎性反應(yīng)為主，而Treg細(xì)胞能通過分泌相關(guān)具有抑制作用的細(xì)胞因子使機(jī)體免疫處于抑制狀態(tài)。尤其白介素-35(Interl

3、eukin35，IL-35)是由Treg細(xì)胞分泌的一種新型細(xì)胞因子，它對(duì)Treg細(xì)胞的功能具有重要的調(diào)節(jié)作用，目前在關(guān)于泡型包蟲病的研究領(lǐng)域還未見報(bào)道。
　　本次研究通過對(duì)臨床肝臟泡型包蟲病患者和健康志愿者的外周血中的CD4+CD25+CD127low Treg細(xì)胞和IL-35的表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)，初步探討CD4+CD25+CD127low Treg細(xì)胞和相關(guān)細(xì)胞因子IL-35對(duì)于泡型包蟲病發(fā)生發(fā)展過程的表達(dá)水平和意義。
　　

4、方法：在2017年01月-2017年09月期間于四川省人民醫(yī)院收治的17例肝臟泡型包蟲病患者和17例健康志愿者被納入到本研究中。將其分為肝臟泡型包蟲病患者組和健康志愿者對(duì)照組兩組。采集受試者外周血檢測(cè)CD4+CD25+CD127low Treg細(xì)胞和IL-35的水平，得到實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)后用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對(duì)兩組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述和分析，并以此來比較分析肝臟泡型包蟲病患者和健康志愿者的外周血中CD4+CD25+CD127low Treg細(xì)胞和相關(guān)細(xì)胞因

5、子IL-35的表達(dá)水平的差異。肝臟泡型包蟲病患者接受手術(shù)后第7天再次采集外周血檢測(cè)CD4+CD25+CD127low Treg細(xì)胞和IL-35的水平，比較與術(shù)前的變化。
　　結(jié)果：在本次研究中發(fā)現(xiàn)肝臟泡型包蟲病患者組的外周血中的CD4+CD25+CD127low Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比例為4.68／～10.30(7.97±1.47)％高于健康志愿者對(duì)照組外周血中CD4+CD25+CD127low Treg細(xì)胞占CD4+T

6、細(xì)胞的比例5.09～9.25(6.65±0.99)％，且兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。在肝臟泡型包蟲病患者組的外周血中測(cè)得IL-35的表達(dá)水平為66.24／～101.23(81.26±10.42)pg/ml高于健康志愿者對(duì)照組的外周血中IL-35的表達(dá)水平19.59～79.64(42.61±17.80)pg/ml，且兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。肝臟泡型包蟲病患者外周血中的IL-35與CD4+CD25+CD127l

7、ow Treg細(xì)胞的水平同步升高，并且使用線性相關(guān)分析的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行分析后得出兩者之間呈正相關(guān)關(guān)系（R=0.5667，P=0.0101)。肝臟泡型包蟲病患者組在接受手術(shù)后第7天再次檢測(cè)外周血中的CD4+CD25+CD127low Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比例為4.29～8.29(6.23±1.10)％，與術(shù)前和健康對(duì)照組相比，三者間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=9.65，P＜0.001)，術(shù)后與術(shù)前相比降低，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=3

8、.05，P＜0.001）;術(shù)后與健康對(duì)照組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(t=1.19，P＞0.05)。肝臟泡型包蟲病患者組在接受手術(shù)后第7天再次檢測(cè)外周血中的IL-35為29.24～71.24(51.90±11.78)pg/ml，與術(shù)前和健康對(duì)照組相比，三者間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=36.79，P＜0.001)，術(shù)后較術(shù)前有所降低，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=7.70，P＜0.001);術(shù)后與健康對(duì)照組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(t=1.79，P＞0.05)。

9、>　　結(jié)論：本研究首次發(fā)現(xiàn)肝臟泡型包蟲病患者外周血中IL-35的表達(dá)水平較健康志愿者顯著升高，且與CD4+CD25+CD127low Treg細(xì)胞的增加呈正性相關(guān)關(guān)系。手術(shù)切除包蟲病灶后，患者外周血中CD4+CD25+CD127low Treg細(xì)胞和IL-35較術(shù)前均降低。這一現(xiàn)象提示CD4+CD25+CD127low Treg細(xì)胞和IL-35可能共同參與了肝臟泡型包蟲病感染泡狀棘球蚴后的免疫應(yīng)答過程，并且CD4+CD25+CD127l