嗜熱鏈球菌分離鑒定、生產(chǎn)特性及雙組分系統(tǒng)差異研究.pdf

1、嗜熱鏈球菌（Streptococcus thermophilus,S.thermophilus）是酸奶等發(fā)酵乳制品中最重要的發(fā)酵菌株，具有很高的經(jīng)濟價值，是公認(rèn)的益生菌，對人體健康有許多積極功效。
　　S.thermophilus菌株的快速生長能力、產(chǎn)酸、代謝乳糖、合成胞外多糖（EPS）、產(chǎn)細(xì)菌素及風(fēng)味物質(zhì)等生產(chǎn)特性，直接關(guān)系到發(fā)酵乳品的品質(zhì)。本研究從傳統(tǒng)發(fā)酵乳中篩選、分離S.thermophilus菌株，并對其進行特性進行分析，

2、旨在獲得優(yōu)良菌株。雙組分信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)（Two-component signal transduction system,TCS）是細(xì)菌感受外界環(huán)境信號的重要機制之一。本研究對篩選獲得S.thermophilus菌株中TCS分布進行研究，旨在確定菌株中TCS數(shù)量和基因序列的信息，進而初步建立TCS與菌株性狀差異之間的聯(lián)系，為明確TCS在菌株生產(chǎn)特性差異中的作用奠定基礎(chǔ)。
　　本研究首先從26個傳統(tǒng)發(fā)酵乳樣品中分離獲得了103株菌株，

3、去除傳代性狀不好的菌株，最終獲得56株菌，其中22株菌呈球形或卵形的形態(tài)，并成對或成鏈出現(xiàn)，經(jīng)鏡檢和生理生化實驗鑒定，初步推測為S.thermophilus。采用16S rRNA鑒定，最終確定上述22株菌為S.thermophilus。根據(jù)16S-23S ITS序列分析，將22株菌分為兩種類型，其中CS2、CS9、CS15和CS21菌株為ITS-St-Ⅰ型，其他菌株為ITS-St-Ⅱ型。為后續(xù)實驗提供借鑒。
　　本研究對22株S.

4、thermophilus的重要生產(chǎn)特性進行研究，主要包括菌株的生長能力、產(chǎn)酸能力、利用碳水化合物能力、抑菌能力、產(chǎn)風(fēng)味物質(zhì)（乙醛）能力、產(chǎn)胞外多糖和蛋白酶的能力等。研究表明22株菌中，CS1、CS3和CS5菌株較為突出，具有生長速率高、產(chǎn)酸能力強、抑菌、產(chǎn)胞外多糖等特點；而CS2和CS9菌株在生長速率、產(chǎn)酸能力、產(chǎn)胞外多糖和產(chǎn)乙醛等特性上處于劣勢。
　　本研究根據(jù)已公布的S.thermophiluLMG18311基因組中的8個TC

5、Ss序列信息設(shè)計相應(yīng)的引物，以22株菌的DNA為模板，擴增TCSs基因，確定菌株中TCS的數(shù)量，并分析TCS的序列差異。研究表明，22株菌株中均含有8個TCSs，但菌株間的TCS序列存在著差異。以菌株的全部TCSs序列信息為基礎(chǔ)，對22株菌株進行聚類分析，結(jié)果表明菌株分為兩大類，大多數(shù)菌株為第I大類；生產(chǎn)性能處于劣勢的CS2、CS6、CS9菌株屬于第Ⅱ大類。第Ⅰ大類，又可分為Ⅰ-1、Ⅰ-2、Ⅰ-3和Ⅰ-4亞類。這一聚類結(jié)果與菌株的特性呈