阿昔洛韋中基因毒性物質的檢測及2-3水合物晶型的制備研究.pdf

1、阿昔洛韋(ACV)是一種重要的抗病毒藥物，主要用于治療單純皰疹病毒所引起的各種感染。在阿昔洛韋質量研究中，總結發(fā)現(xiàn)阿昔洛韋合成工藝中使用的一種催化劑對甲苯磺酸屬于基因毒性物質，在阿昔洛韋中的殘留應控制在3ppm以下。因此有必要建立一種靈敏度高、重復性好的檢測方法用于檢測阿昔洛韋產(chǎn)品中對甲苯磺酸的殘留。此外阿昔洛韋存在6種晶型，相比其他幾種晶型，阿昔洛韋2/3水合物具有更好的生物利用度和臨床療效，需要對阿昔洛韋2/3水合物晶型的制備方法進

2、行深入研究。本論文的研究圍繞上述兩個問題展開，具體內容如下:
　　首先是阿昔洛韋中基因毒性物質對甲苯磺酸的檢測:論文通過先固相萃取富集，后HPLC檢測的方法，測定阿昔洛韋中對甲苯磺酸的殘留。通過對固相萃取柱類型、樣品上樣速率、洗脫液濃度和洗脫速率等萃取分離參數(shù)的選擇，建立阿昔洛韋中對甲苯磺酸的固相萃取方法為:0.1g阿昔洛韋溶于10mL濃度為10-4 M鹽酸，在Cleanert SAX固相萃取柱上，阿昔洛韋溶液先以1.0mL/mi

3、n上樣，用10-4M的HCl淋洗萃取柱至完全除去阿昔洛韋，最后用10mL濃度為1.0M鹽酸洗脫，收集濾液定容到10mL，富集得到的對甲苯磺酸通過HPLC法進行定量分析。通過對流動相和檢測條件的選擇，建立對甲苯磺酸的色譜條件為:色譜柱:Inertsil ODS-SP C18柱(150mm×4.6mm，5μm);流動相:乙腈∶0.1％磷酸溶液=15∶85（v/v）;柱溫:30℃;流速:1.0mL/min;檢測波長:222nm。通過對富集-檢

4、測方法的專屬性、重復性、線性、靈敏度、準確度和耐用性的考察，證明該方法具有重復性好，靈敏度高，耐用性好，操作簡便等優(yōu)點，能有效檢測阿昔洛韋中對甲苯磺酸的殘留。
　　第二部分是阿昔洛韋2/3水合物晶型制備研究:通過對降溫結晶法、反溶劑沉淀法和反應沉淀法進行初步篩選后發(fā)現(xiàn):降溫結晶法和反溶劑沉淀法制得的產(chǎn)品失水率、PXRD數(shù)據(jù)與阿昔洛韋2/3水合物數(shù)據(jù)不符;而反應沉淀法得到的產(chǎn)品用TG、FT-IR和PXRD表征，發(fā)現(xiàn)其晶型屬于阿昔洛韋

5、2/3水合物。在反應沉淀法中，阿昔洛韋溶于氫氧化鈉溶液形成阿昔洛韋鈉鹽，用鹽酸中和后，沉淀結晶得到阿昔洛韋2/3水合物。通過對制備參數(shù)如:氫氧化鈉濃度、鹽酸濃度、鹽酸滴加速率、結晶溫度和攪拌速率等選擇，確定反應沉淀法的制備參數(shù)如下:將阿昔洛韋溶于1.25M的氫氧化鈉溶液中，以2mL/min的滴加速率滴加1.0M鹽酸中和等量的氫氧化鈉，控制溶液溫度為10℃，攪拌速率為300rpm，待鹽酸滴加完畢，停止攪拌，靜置3h，將析出的阿昔洛韋晶體經(jīng)

6、減壓抽濾，在50℃下干燥20h，得到阿昔洛韋2/3水合物。制備得到的阿昔洛韋產(chǎn)品采用TG、FT-IR和PXRD進行晶型表征屬于阿昔洛韋2/3水合物。該制備方法收率為93％，且制備方法便于生產(chǎn)放大。將阿昔洛韋2/3水合物在40±2℃加速試驗下，保存6個月，其PXRD和HPLC穩(wěn)定性數(shù)據(jù)表明其具有很好的穩(wěn)定性。實驗最后，嘗試用阿昔洛韋粗品制備阿昔洛韋2/3水合物，制得產(chǎn)品的TG和PXRD數(shù)據(jù)和阿昔洛韋2/3水合物的一致，但仍有雜質未降到合格