復(fù)方庚酸炔諾酮注射液細(xì)菌內(nèi)毒素檢測方法研究.pdf

1、目前國內(nèi)外藥品中熱原的檢測方法主要有熱原檢測法和細(xì)菌內(nèi)毒素檢測法。隨著人們對熱原本質(zhì)的深入認(rèn)識，目前普遍的觀點(diǎn)認(rèn)為藥品中沒有細(xì)菌內(nèi)毒素檢出也就沒有熱原性物質(zhì)。半個(gè)多世紀(jì)以來，采用家兔法（PT法）檢查熱原曾對保證藥品的安全發(fā)揮了重要的作用，但是家兔法耗時(shí)長，不經(jīng)濟(jì)，且有很多局限性。細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法（BET法）因其簡便、靈敏、快速、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，已被廣泛用于檢查藥品注射劑及其原料藥和臨床醫(yī)療器具中的致熱物質(zhì)。作為體外熱原檢查法的細(xì)菌內(nèi)毒素檢查

2、法逐步替代傳統(tǒng)的PT法檢查熱原成了必然趨勢。
　　復(fù)方庚酸炔諾酮注射液在《中國藥典》2010版中有收載，其質(zhì)量指標(biāo)中沒有細(xì)菌內(nèi)毒素檢測項(xiàng)，但企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中有熱原檢測項(xiàng)，由于試驗(yàn)中以兔子作為試驗(yàn)對象，在國際對動物保護(hù)呼聲日趨高漲的形勢下，開發(fā)合適的細(xì)菌內(nèi)毒素檢測方法來替代熱原檢查就成了必然的發(fā)展趨勢。本文參照藥品細(xì)菌內(nèi)毒素檢查的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，研究開發(fā)復(fù)方庚酸炔諾酮注射液適宜的細(xì)菌內(nèi)毒素檢測方法，來替代熱原檢查法，并對其可行性進(jìn)行確認(rèn)。

3、>　　本文先從對細(xì)菌內(nèi)毒素檢測方法與熱原檢測方法的優(yōu)缺點(diǎn)分析開始，確定用細(xì)菌內(nèi)毒素檢測方法中的鱟試劑凝膠法來檢測復(fù)方庚酸炔諾酮注射液中的細(xì)菌內(nèi)毒素值。進(jìn)而分析了各種影響到鱟試劑凝膠法結(jié)果的因素，并在試驗(yàn)中避免。依據(jù)細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法的建立原則開展復(fù)方庚酸炔諾酮注射液細(xì)菌內(nèi)毒素檢測方法的建立。
　　復(fù)方庚酸炔諾酮注射液為非水溶性油溶液，故無法將其中所含的細(xì)菌內(nèi)毒素直接利用鱟試劑凝膠法檢測。先將復(fù)方庚酸炔諾酮注射液按注射用油的方法，即與

4、水混合振蕩后在2500r/min下離心分離處理10min后將細(xì)菌內(nèi)毒素從油溶液中萃取到水中，但樣品陽性管不凝集，故只能尋找其他合適的方法來檢測其細(xì)菌內(nèi)毒素限值。分析原因可能是復(fù)方庚酸炔諾酮注射液中所含的原藥或輔料起到了干擾作用，就選擇了親水性強(qiáng)的聚山梨酯-80，先將復(fù)方庚酸炔諾酮注射液乳化后形成乳濁液后再進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素檢測。通過干擾試驗(yàn)證明，該處理方法能有效地用鱟試劑凝膠法檢測出復(fù)方庚酸炔諾酮注射液中的細(xì)菌內(nèi)毒素。
　　通過于熱原