鱷魚活性多肽的理化性質(zhì)及生物學(xué)效應(yīng).pdf

1、本論文通過3種蛋白酶酶解鱷魚肉的產(chǎn)物比較、成分分析和生理功能研究,開發(fā)鱷魚多肽保健品。
　　 分別用菠蘿蛋白酶、胰蛋白酶以及中性蛋白酶對鱷魚肉進(jìn)行酶解處理,以酶解產(chǎn)物中的游離氨基酸含量的多寡即降解度為標(biāo)準(zhǔn)探討了酶解的最佳條件,包括水解時(shí)間、酶量、溫度等,結(jié)果表明,采用胰蛋白酶酶解較為理想,酶解時(shí)間為4 h,酶量為0.4％較為合理。將酶解處理液通過離心,去除不溶的雜質(zhì),取上清,噴霧干燥,得到的鱷魚活性多肽粉為白色粉末,得率為10.

2、5％(100 g鮮肉得到10.5 g干粉),顯著高于文蛤肉粉的得率6.5％。
　　 分析該保健品的主要成分、金屬元素、氨基酸組成和多肽分子量的范圍,發(fā)現(xiàn)鱷魚多肽粉中氨基酸種類齊全,含量豐富,占干物質(zhì)的77.04％,其中8種人體必需氨基酸,含量豐富,占干物質(zhì)的27.45％,為所有氨基酸總量的35.63％。尤其人體需要量最大的賴氨酸和亮氨酸含量顯著較多。支鏈氨基酸(包括纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為11.99％,芳香族氨基酸

3、(包括苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5.42％。同時(shí)鱷魚多肽粉中對人體有益的金屬元素含量從高到低依次為K、Na、Ca、Mg、Fe、Zn、Cu,其中鎂、鐵元素含量豐富分別可達(dá)到1033.53 mg/kg和253.86mg/kg。對人體有害的重金屬含量都大大低于國家食品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的安全劑量。通過MALDI-TOF質(zhì)譜分析得到,鱷魚活性多肽主要由分子量主要集中在1000-1300 Da的這個(gè)范圍之間。分子量在1187.6 Da、1238

4、.4 Da的多肽含量較高。這一實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示,我們使用的酶解方法,酶解效果較為理想、鱷魚肉得到較為徹底水解。
　　 研究本品對酪氨酸酶的抑制效果、抗氧化作用、對小鼠的抗疲勞作用、對昆明種小鼠的急性毒理作用和免疫調(diào)節(jié)作用。.結(jié)果表明鱷魚多肽對酶活力有較強(qiáng)的抑制作用,且抑制率與其濃度成正相關(guān)。導(dǎo)致酶活力下降50％所需的鱷魚多肽的濃度(IC50)為6.60 mg/mL,對DPPH自由基和羥基自由基都具有很強(qiáng)的清除作用,在較低的質(zhì)量濃度下

5、即有較高的清除效果,且隨其質(zhì)量濃度的增加而不斷增強(qiáng),其IC50分別為6.5和1.2 mg/mL,抗氧化作用明顯。根據(jù)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)國際GB1519.3-2003食品急性毒性試驗(yàn)中最大耐受劑量法,對清潔級KM小鼠無毒害作用,作用后小鼠均健康無異常反應(yīng),解剖無明顯病變,其LD5015 g/kg;鱷魚多肽粉鱷魚肉多肽粉有促進(jìn)小鼠胸腺和脾臟的生長發(fā)育,提高機(jī)體免疫功能;小鼠爬繩和力竭游泳實(shí)驗(yàn)顯示鱷魚多肽粉具有提高小鼠運(yùn)動(dòng)能力,通過提高血液中SOD酶活