實(shí)驗(yàn)性大鼠彌漫性腦損傷后GFAP、NO和ET的變化研究.pdf

1、背景和目的；創(chuàng)傷性腦損傷(Traumaticbraininjury,TBI)有較高發(fā)生率，是導(dǎo)致創(chuàng)傷病人傷殘及死亡的主要原因，嚴(yán)重危害人類(lèi)健康，給社會(huì)和家庭帶來(lái)沉重負(fù)擔(dān)。彌漫性腦損傷(Diffusebraininjury,DBI)在TBI中占有重要地位，流行病學(xué)調(diào)查顯示DBI占交通傷后重型腦創(chuàng)傷的73％。長(zhǎng)期以來(lái)，DBI被認(rèn)為是腦損傷后持續(xù)性昏迷及嚴(yán)重神經(jīng)功能障礙的主要原因，有人統(tǒng)計(jì)創(chuàng)傷性昏迷病人資料發(fā)現(xiàn)有55％重度腦創(chuàng)傷病人存在DBI

2、。DBI后可誘發(fā)系列病理生理改變(如腦血管自主調(diào)節(jié)功能紊亂、血腦屏障通透增加、腦組織缺血、顱內(nèi)壓增高等)、腦組織各種物質(zhì)(如氧自由基、鈣離子、興奮性氨基酸、炎性細(xì)胞因子、電解質(zhì)等)代謝紊亂及細(xì)胞凋亡等，造成腦組織繼發(fā)損害，進(jìn)一步加重病人腦損傷程度。目前對(duì)DBI的研究逐漸深入，但其機(jī)理尚未完全闡明，限制了治療學(xué)的發(fā)展。研究DBI發(fā)病機(jī)制及其傷后病理生理變化、探索行之有效的腦保護(hù)治療途徑，將有助于提高病人的生存率及生存質(zhì)量。我們改進(jìn)了Mar

3、marou法制作大鼠彌漫性腦損傷模型，利用該模型觀察損傷后腦組織的病理變化，檢測(cè)反應(yīng)性星形細(xì)胞(astrocyte，Ast)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein，GFAP)表達(dá)變化，并研究一氧化氮(nitricoxide，NO)和內(nèi)皮素(endothlin，ET)在大鼠創(chuàng)傷腦組織中不同時(shí)間含量的變化規(guī)律，以探討顱腦損傷的病理機(jī)制，進(jìn)一步闡明三者在顱腦損傷后病理生理變化中的作用，為臨床治療腦損傷提供實(shí)

4、驗(yàn)基礎(chǔ)。 方法；1、建立彌漫性腦損傷動(dòng)物模型：采用Marmarou方法改良制作大鼠DBI模型。同時(shí)建立對(duì)照組進(jìn)行對(duì)照比較。 2、腦組織病理形態(tài)學(xué)變化觀察：常規(guī)HE染色觀察大鼠大腦皮層及其深部組織的形態(tài)學(xué)改變。 3、GFAP表達(dá)情況檢測(cè)：用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)反應(yīng)性星形細(xì)胞GFAP表達(dá)變化，并進(jìn)行數(shù)據(jù)采集和分析。 4、腦組織NO的測(cè)定：采用硝酸還原酶法檢測(cè)腦組織中NO含量。 5、腦組織ET的測(cè)定：采

5、用放射免疫法檢測(cè)腦組織中ET含量。 結(jié)果；1、各損傷組大鼠腦組織病理改變均符合DBI形態(tài)特征，鏡下可見(jiàn)神經(jīng)元胞體明顯腫脹，結(jié)構(gòu)不清，核固縮，胞漿紅染加深，膠質(zhì)細(xì)胞腫脹明顯，細(xì)胞周?chē)g質(zhì)水腫。以傷后24h-48h組織形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)改變最明顯。 2、GFAP染色顯示大鼠對(duì)照組僅在皮層、胼胝體，海馬及血管周?chē)梢?jiàn)少量散在分布的弱陽(yáng)性細(xì)胞，DBI6h即可見(jiàn)皮層及海馬GFAP陽(yáng)性細(xì)胞增多，24h繼續(xù)增多，48h達(dá)高峰，星形細(xì)胞反應(yīng)波及

6、全腦，海馬組織中尤為明顯，120h有減少但仍與6h組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 3、腦組織中NO含量在DBI6h已有上升，24h持續(xù)增高，48h時(shí)達(dá)到高峰，120h有下降但仍高于6h組。 4、腦組織中ET含量在DBI6h已有上升，至24h時(shí)達(dá)到高峰，48h略有下降但仍處于較高水平，120h繼續(xù)降低但仍高于對(duì)照組。 結(jié)論；1、本研究成功復(fù)制了彌漫性腦損傷的動(dòng)物模型。 2、DBI后星形膠質(zhì)細(xì)胞出現(xiàn)肥大與增生，其標(biāo)志性蛋白