棉織物為載體的過氧化氫酶固定化方法及其性能研究.pdf

1、紡織品材料作為生物酶固定化載體，可免除酶處理后的過濾步驟，且無蛋白質(zhì)殘留，是一種優(yōu)良的固定化載體。本文以棉織物及絲光棉織物為固定化載體，分別采用吸附法、共價法固定過氧化氫酶，并探討了絲光處理對以棉纖維為載體的過氧化氫酶固定的影響。
　　 吸附法固定化過氧化氫酶實驗中，主要分析了吸附時間、溫度對固定化酶活力的影響，確定了最優(yōu)固定化條件。絲光處理降低了纖維的結(jié)晶度，增大了過氧化氫酶大分子在棉纖維上的可及區(qū)域。同未處理棉織物相比，以絲

2、光處理后的棉織物為載體時，酶的固定化時間較未處理的棉織物短，且過氧化氫酶的吸附量高于未處理的棉織物。
　　 采用了傅里葉紅外分析技術(shù)研究了固定化酶的化學(xué)結(jié)構(gòu)，在紅外譜圖中可看到固定化后的織物上出現(xiàn)酰胺峰，表明過氧化氫酶被固定在織物上。通過掃描電鏡觀察到了過氧化氫酶被固定在織物上。
　　 共價法固定過氧化氫酶研究了三聚氯氰活化載體的實驗溫度、三聚氯氰的量、活化時間對固定化酶活性的影響，得到了最優(yōu)活化條件。并進一步確定了固定

3、化酶的最優(yōu)固定化條件。載體經(jīng)活化后，在紅外譜圖中可看到三嗪環(huán)的振動峰?；罨d體酶固定化后，紅外譜圖中出現(xiàn)亞酰胺振動峰，證明載體被三聚氯氰活化后，過氧化氫酶被成功固定在載體上。掃描電鏡也進一步證明了實驗結(jié)果。
　　 兩種方法固定化得到的固定化酶，考察了其最適溫度、最適pH值、操作穩(wěn)定性、熱穩(wěn)定性、動力學(xué)參數(shù)。實驗結(jié)果表明經(jīng)固定化后，酶的熱穩(wěn)定性優(yōu)于游離酶，適應(yīng)溫度、pH的范圍變寬，固定化酶的穩(wěn)定性得到了提高。固定化酶動力學(xué)參數(shù)Km