猴頭菌多糖提取、脫色工藝及生物活性的研究.pdf

1、多糖是猴頭菌中的主要活性物質(zhì)，目前，市場(chǎng)上銷(xiāo)售的猴頭菌制品大部分只進(jìn)行了簡(jiǎn)單加工，存在大量雜質(zhì)，即便是猴頭菌多糖制品，也多為未經(jīng)優(yōu)化的粗多糖，含有較多蛋白質(zhì)、色素，影響色澤的同時(shí)也不利于多糖最佳功效的發(fā)揮。所以找到適用于工業(yè)生產(chǎn)的粗多糖制備工藝及如何得到生物活性好的多糖至關(guān)重要。本論文對(duì)猴頭菌粗多糖的水提醇沉制備工藝各參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化，對(duì)猴頭菌多糖的脫色方法進(jìn)行了詳細(xì)研究，并比較了脫色前后猴頭菌多糖的理化性質(zhì)及生物活性，為猴頭菌多糖的深度

2、開(kāi)發(fā)利用奠定了理論基礎(chǔ)。論文的主要內(nèi)容如下:
　　 1、采用單因素實(shí)驗(yàn)詳細(xì)考察了水提醇沉中影響猴頭菌多糖得率及含量的各個(gè)因素，并對(duì)幾種多糖的干燥方式進(jìn)行了比較，篩選出適合猴頭菌多糖的干燥方式;選取對(duì)猴頭菌多糖得率及含量有較大影響的因素通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)得到優(yōu)化的提取醇沉工藝為熱水提取兩次，乙醇終濃度為70％，液料比15∶1，濃縮比3∶1。通過(guò)各種酶法提取與對(duì)照的比較，對(duì)酶法提取方法進(jìn)行了探索，發(fā)現(xiàn)大部分單一酶并不能提高多糖的得率及含量

3、。
　　 2、以脫色率，多糖保留率及體外免疫活性為指標(biāo)，對(duì)三種常用的脫色方法進(jìn)行比較，得出大孔樹(shù)脂更適合用于猴頭多糖的脫色。從十種不同類(lèi)型的大孔樹(shù)脂中篩選出大孔弱堿性陰離子樹(shù)脂D315最適合于猴頭菌粗多糖的脫色。以脫色率，多糖保留率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，通過(guò)考察影響猴頭菌粗多糖脫色的各個(gè)因素，在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，運(yùn)用Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理，采用三因素三水平的響應(yīng)面分析法，建立了脫色率及多糖保留率與樹(shù)脂體積(mL)、脫色時(shí)間(h

4、)、樣品濃度(mg/mL)之間的二次回歸模型，在響應(yīng)曲面圖和等高線圖的分析基礎(chǔ)上，對(duì)回歸模型進(jìn)行數(shù)學(xué)分析得到優(yōu)化的靜態(tài)脫色工藝為:100mL加入樹(shù)脂37.12mL，脫色時(shí)間6小時(shí)，粗多糖濃度為13.85 mg/mL，脫色率(％)及多糖保留率(％)的理論值分別為70.59％和81.12％。在靜態(tài)脫色的基礎(chǔ)上，對(duì)動(dòng)態(tài)脫色的工藝進(jìn)行了研究，得到優(yōu)化的動(dòng)態(tài)脫色工藝:流速為0.6BV/h，上樣量270mL，大孔樹(shù)脂D315在進(jìn)行簡(jiǎn)單預(yù)處理后，可重

5、復(fù)使用八次以上。
　　 3、對(duì)猴頭菌多糖脫色前后的理化性質(zhì)（多糖含量、蛋白含量、分子量分布、單糖組成、特征基團(tuán)）、體外免疫活性及對(duì)大鼠胃黏膜損傷修復(fù)作用進(jìn)行了比較研究。研究表明，猴頭菌多糖脫色后，多糖含量有小幅度提高，蛋白含量下降明顯，單糖組成種類(lèi)不變，巖藻糖所占比例略有下降，半乳糖及葡萄糖比例略有上升，C=O基團(tuán)的振動(dòng)減弱。粗多糖中含有β構(gòu)型多糖，脫色過(guò)程可能使β構(gòu)型多糖富集。
　　 猴頭菌多糖體外免疫活性在脫色后得到