呋喃唑酮及其代謝物酶聯(lián)免疫檢測方法的研究.pdf

1、本論文對呋喃唑酮及其代謝物3-氨基-2-惡唑烷酮(AOZ)獸藥殘留的酶聯(lián)免疫檢測方法進行了的研究。合成了針對呋喃嘩酮原藥和代謝物的衍生物3-(2-硝基苯亞甲基)-氨基-2-惡唑烷酮(NPAOZ)均具有高度類似性的半抗原3-[(4-羧基苯基)-甲基]氨基-2-惡唑烷酮(CPAOZ)，用活性酯法和混合酸酐法連接蛋白作為免疫原，比較其免疫效果。
　　 在間接酶聯(lián)免疫檢測方法中，異源包被原是將呋喃唑酮原藥的硝基還原成氨基后用戊二醛法連接

2、蛋白OVA獲得。由活性酯法連接的免疫原得到的血清對NPAOZ和呋喃唑酮均表現(xiàn)了良好的親和力，IC50分別為2.5μg/L和2.0μg/L，出限(IC15)分別為0.25μg/L和0.09μg/L。在直接酶聯(lián)免疫競爭優(yōu)化中，抗體表現(xiàn)出更低的檢出限，IC15分別為0.02μg/L和0.05μg/L，相應(yīng)的IC50分別為2.1μg/L和2.8μg/L。抗體展現(xiàn)了良好的特異性，與其他的硝基呋喃原藥、相應(yīng)代謝物、結(jié)構(gòu)類似物均無交叉反應(yīng)。
　

3、　 由于在體內(nèi)易分解的呋喃唑酮經(jīng)常被不合法的應(yīng)用于動物養(yǎng)殖過程中，導(dǎo)致具有致癌、致突變性的代謝物AOZ殘留，本實驗選取了動物飼料和動物組織分別作為呋喃唑酮和其代謝物AOZ研究對象，包括：雞飼料、豬肉、豬肝、豬腎、雞肉、雞肝、蝦。檢測方法較之前的方法靈敏性更高，方法在三個不同的添加濃度1，5，20μg/kg，雞飼料、豬肉、豬肝、豬腎、雞肉、雞肝、蝦的回收率在76％-109％之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差4.7％-11％之間。
　　 通過高效