藻藍蛋白酶解條件優(yōu)化及產(chǎn)物抑制肥胖相關(guān)酶活性的研究.pdf

1、本文首先以蛋白含量和氨基酸含量為指標,篩選螺旋藻藻株,其次利用反復(fù)凍融結(jié)合超聲波法破碎藻絲體細胞,采用鹽析法制備藻藍蛋白,最后通過水解條件優(yōu)化確定藻藍蛋白的酶解工藝,進而研究酶解產(chǎn)物抑制肥胖相關(guān)酶的活性,為螺旋藻及其藻藍蛋白在醫(yī)療、保健領(lǐng)域的應(yīng)用提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:
　　1、螺旋藻藻株的篩選
　　在9000lx光照強度,光暗比12:12h,晝夜溫度分別為30℃和28℃的培養(yǎng)條件下,螺旋藻藻株40SY的生長較快,具

2、有較高的蛋白含量(58.62％)和氨基酸含量(總氨基酸50.21mg/100mg、必需氨基酸相對含量38.69%),并且與已報道的抗肥胖肽作比較,該螺旋藻中的精氨酸(4.09mg/100mg,相對含量8.14%)、組氨酸(0.91mg/100mg,相對含量1.81%)、脯氨酸(1.34mg/100mg,相對含量2.66%)和亮氨酸(4.64mg/100mg,相對含量9.23%)含量均為最高。
　　2、藻藍蛋白抗肥胖酶解產(chǎn)物的制備<

3、br>　　以胰脂肪酶抑制活性為指標,評價中性蛋白酶、堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶酶解藻藍蛋白的效果,選用效果最明顯(43.89%)的中性蛋白酶為試驗用酶,經(jīng)過單因素試驗和響應(yīng)面分析確定了中性蛋白酶水解藻藍蛋白制備具有抑制胰脂肪酶和α-淀粉酶活性的酶解產(chǎn)物的最佳條件,即酶解溫度47℃、pH7、酶解4.5h、加酶量118U/ml。此時該酶解產(chǎn)物的胰脂肪酶抑制率和α-淀粉酶抑制率分別為53.88%、36.21%。
　　3、藻藍蛋白酶