固定化脂肪酶在離子液體中催化合成生物柴油的研究.pdf

1、本文通過響應(yīng)面法對(duì)實(shí)驗(yàn)室保藏產(chǎn)脂肪酶細(xì)菌BurkholderiacepaciaGX-35的發(fā)酵產(chǎn)酶培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化以提高脂肪酶活力，結(jié)果得到預(yù)測(cè)酶活的回歸方程：Y=16.0232-0.0457X1+0.0232X2+0.01423X3-0.0754X12-0.1337X22-0.0625X32+0.0275X1X2-0.0625X1X2-0.1025X2X3。最佳產(chǎn)酶的發(fā)酵培養(yǎng)基組成為(％，w/v):糊精1.0、牛肉膏1.2、花生油1.5

2、、吐溫-600.017、K2HPO40.1、pH6.9，水解酶活為15.98U/mL。
　　 對(duì)GX-35所產(chǎn)脂肪酶的固定化條件進(jìn)行了初步探索，獲得了較好的結(jié)果。比較了水相吸附法、載體涂布法和有機(jī)溶劑沉淀法的固定化效果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，載體涂布法效果較理想。在對(duì)固定化載體進(jìn)行選擇時(shí)，比較了硅膠、硅藻土、氧化鋁和陽離子交換樹酯的固定化效果，發(fā)現(xiàn)硅膠作為固定化載體較理想。最后，確定了以硅膠為載體通過載體涂布法固定化脂肪酶的最優(yōu)條件為：0.

3、025mol/L、pH7.5磷酸緩沖液、固定化時(shí)間1.5h、固定化溫度30℃、酶液與硅膠質(zhì)量比為5:1。
　　 離子液體極性可調(diào)，因此，可以設(shè)計(jì)出極性不同的離子液體，以提高合成生物柴油的底物-花生油和乙醇在反應(yīng)體系中的溶解度，從而提高轉(zhuǎn)酯反應(yīng)的效率。為此，初步比較了固定化脂肪酶在四種離子液體中催化轉(zhuǎn)酯反應(yīng)的效果，并探討了固定化脂肪酶在離子液體中催化轉(zhuǎn)酯反應(yīng)的條件。結(jié)果表明，在[EMIM]Br加入量為花生油質(zhì)量的60％、加水量為5