Bacillus subtilis ZJUTZY發(fā)酵生產(chǎn)γ-聚谷氨酸及其絮凝特性研究.pdf

1、γ-PGA(γ-聚谷氨酸)是一種通過(guò)微生物合成的均聚氨基酸化合物，它由谷氨酸單體以γ-羧基與氨基相縮合而成，是一種水溶性和可生物降解的新型生物高分子材料，近年來(lái)由于其被作為增稠劑，保濕劑，藥物載體等而一直被廣泛應(yīng)用于工業(yè)領(lǐng)域，是一種有極大開(kāi)發(fā)價(jià)值和前景的多功能性生物制品。 本文以菌落粘度為初篩標(biāo)記，從納豆及實(shí)驗(yàn)室保藏菌種中篩選得到了一株產(chǎn)γ-PGA的菌株，該菌株發(fā)酵液經(jīng)過(guò)有機(jī)溶劑沉淀，得到的產(chǎn)物經(jīng)過(guò)水解和HPLC分析，主要成分為

2、證明主要組分為谷氨酸。通過(guò)形態(tài)以及生理生化性質(zhì)測(cè)定，初步鑒定為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)，進(jìn)一步通過(guò)16S rDNA擴(kuò)增和測(cè)序(GenBank中登錄號(hào)為EF694950)，也證明該菌株為Bacillus subtilis，命名為ZJUTZY。SDS-PAGE法電泳結(jié)果表明，Bacillus subtilis ZJUTZY 產(chǎn)γ-PGA的分子量分布范圍在40kDa～110kDa之間。 利用2,4-二硝基氟苯

3、能和氨基發(fā)生反應(yīng)并在356nm處有紫外吸收的性質(zhì)，建立了一種簡(jiǎn)易的檢測(cè)方法，能同步測(cè)定γ-聚谷氨酸的產(chǎn)量和平均相對(duì)分子質(zhì)量，并用于對(duì)Bacillus subtilis ZJUTZY產(chǎn)γ-聚谷氨酸條件的單因素初篩，獲得該菌株的較佳發(fā)酵條件為：甘油60g/L，蛋白胨60g/L，谷氨酸鈉160g/L，磷酸氫二鉀0.5g/L，發(fā)酵溫度28℃，培養(yǎng)基初始pH值為6.0，搖床轉(zhuǎn)速為200r/min，γ-PGA產(chǎn)量可達(dá)到56.07g/L，平均相對(duì)分子