血紅素加氧酶-1作為慢性粒細(xì)胞白血病治療靶向分子的基礎(chǔ)研究.pdf

1、目的：慢性粒細(xì)胞白血病(以下簡稱慢粒)是一種造血干細(xì)胞克隆增生性疾病，隨著分子生物學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)等學(xué)科的發(fā)展，對慢粒的發(fā)病機(jī)制有了深入的了解，并針對發(fā)病機(jī)制有了很多的治療方法，伊馬替尼作為慢粒的分子靶向治療已經(jīng)應(yīng)用于臨床多年，近年逐漸出現(xiàn)伊馬替尼耐藥的現(xiàn)象，于是尋求新的慢粒的靶向治療分子成為臨床目前需要解決的問題。有研究表明血紅素加氧酶-1（H0-1）被認(rèn)為具有細(xì)胞保護(hù)作用，可以對抗細(xì)胞的凋亡，并且在慢粒細(xì)胞中呈組成性的表達(dá)，基于這些本

2、研究探討HO-1在慢粒細(xì)胞中的表達(dá)，研究其對抗細(xì)胞凋亡的效應(yīng)，并探討抑制HO-1的表達(dá)對細(xì)胞凋亡的影響。
　　方法：1）提取慢?；颊吖撬柩锌?RNA，RT-PCR檢測慢?；颊吖撬柩?H0-1的表達(dá)；2）利用不同濃度血紅素（0μmol/L，10μmol/L，20μmol/L，30μmol/L）處理慢粒白血病細(xì)胞（K562細(xì)胞）后提取K562細(xì)胞中的RNA,RT-PCR檢測不同濃度處理后K562細(xì)胞中H0-1的表達(dá)；3）收集不同濃

3、度血紅素處理的K562細(xì)胞，利用Western blot檢測HO-1的表達(dá)；4）不同濃度血紅素處理K562細(xì)胞后，利用MTT法檢測細(xì)胞的存活率；5）給予H0-1的抑制劑ZnPPⅨ后MTT法檢測細(xì)胞的存活率。
　　結(jié)果：1）RT-PCR結(jié)果顯示慢?；颊吖撬柩蠬0-1表達(dá)陽性；2）用不同濃度（0μmol/L，10μmol/L，20μmol/L，30μmol/L）的血紅素處理K562細(xì)胞20h后，RT-PCR檢測出HO-1 mRNA的

4、表達(dá)量隨血紅素濃度的升高而增加；3）用不同濃度（0μmol/L，10μmol/L，20μmol/L，30μmol/L）的血紅素處理K562細(xì)胞20h后，Western blot檢測出HO-1 mRNA的表達(dá)量隨血紅素濃度的升高而增加；4） MTT檢測出細(xì)胞的存活率與血紅素濃度成正相關(guān)；5）給予H0-1的抑制劑ZnDPPⅨ后，與對照組相比，實驗組細(xì)胞的存活率明顯下降。
　　結(jié)論：慢性粒細(xì)胞白血病患者骨髓血中HO-1的表達(dá)陽性，慢粒細(xì)