前列腺癌中XAF1表達(dá)及生長(zhǎng)抑素對(duì)其表達(dá)調(diào)節(jié)的研究.pdf

1、背景：前列腺癌是男性最常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率居世界第五位，在男性中居第二位。2010年，美國新增前列腺癌患者217，730例，死亡32，050例。盡管亞洲男性前列腺癌的發(fā)病率低于非洲和美洲，但近年來，中國男性前列腺癌的發(fā)病率呈明顯上升趨勢(shì)。因此探索前列腺癌防治新策略，是應(yīng)對(duì)當(dāng)前前列腺癌發(fā)病率升高的當(dāng)務(wù)之急。早期前列腺癌依賴于雄激素生長(zhǎng)，雄激素去勢(shì)治療(androgen-depdvation therapy，ADT)是早期前列腺癌廣泛

2、采取的標(biāo)準(zhǔn)初始治療方式，但幾乎前列腺癌都會(huì)由早期的激素依賴性轉(zhuǎn)變?yōu)榧に胤且蕾囆?，并最終轉(zhuǎn)變?yōu)榧に仉y治性，明確前列腺癌發(fā)生發(fā)展及耐藥機(jī)制將有利于治療策略開發(fā)，但目前前列腺癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)制尚未闡明。國內(nèi)外學(xué)者對(duì)此進(jìn)行了大量研究，目前焦點(diǎn)集中于前列腺癌細(xì)胞的抗凋亡機(jī)制。研究指出前列腺癌細(xì)胞能夠以一種高效復(fù)合的機(jī)制逃避細(xì)胞凋亡，無限增殖。而X染色體連鎖凋亡抑制蛋白(XIAP)相關(guān)因子1(XAF1)是新近發(fā)現(xiàn)的凋亡促進(jìn)因子，XIAP通過與casp

3、ases結(jié)合并抑制caspases的功能進(jìn)而抑制細(xì)胞凋亡，XAF1能夠拮抗XIAP的這種作用從而促進(jìn)細(xì)胞凋亡。XAF1在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。研究表明，XAF1使腫瘤細(xì)胞對(duì)腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、干擾素β(IFN-β)等敏感性升高，并與上述因子聯(lián)合作用使腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)受抑制，因此，XAF1參與腫瘤細(xì)胞凋亡過程，并發(fā)揮重要作用。XAF1在多種腫瘤組織中低表達(dá)，如胃癌、結(jié)腸直腸癌、膀

4、胱上皮癌、惡性黑色素瘤、腎透明細(xì)胞癌、小細(xì)胞肺癌、膀胱癌、和B型慢性淋巴細(xì)胞性白血病等，然而，XAF1在前列腺癌中的表達(dá)及意義少見報(bào)道。闡明XAF1在前列腺癌中的表達(dá)狀況及其在前列腺癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用，將能夠?yàn)榍傲邢侔┓乐涡虏呗蕴峁?shù)據(jù)支持及理論依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)研究中，臨床收集20例原發(fā)前列腺癌患者的癌組織以及與癌組織鄰近的正常前列腺組織作比較，通過RT-PCR和Western blot方法檢測(cè)收集的組織標(biāo)本中XAF1 mRNA和蛋白的

5、表達(dá)情況；于醫(yī)院病理科獲取49例前列腺增生患者和26例原發(fā)前列腺癌患者的組織切片，通過免疫組織化學(xué)方法觀察組織切片中XA目的蛋白表達(dá)情況，以此探討凋亡促進(jìn)因子XAF1對(duì)前列腺癌發(fā)生發(fā)展可能產(chǎn)生的影響，為以XAF1為靶基因的前列腺癌防治提供一定的理論依據(jù)。
　　 目的：觀察凋亡促進(jìn)因子XAF1在前列腺癌中的表達(dá)，探討其在前列腺癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用及意義，為以XAF1為靶基因的前列腺癌治療提供理論依據(jù)及數(shù)據(jù)支持。
　　 方

6、法：⑴經(jīng)山東大學(xué)齊魯醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，1165床收集20例原發(fā)前列腺癌患者的癌組織及與癌組織鄰近的正常前列腺組織，分裝于經(jīng)高溫高壓滅菌后的EP管中，-80℃冰箱凍存?zhèn)溆?。⑵于山東大學(xué)齊魯醫(yī)院病理科收集49例前列腺增生患者和26例原發(fā)前列腺癌患者的蠟塊。⑶將前列腺癌組織和與癌組織鄰近的正常前列腺組織作比較，通過RT-PCR和Western bolt方法，檢測(cè)20例原發(fā)前列腺癌患者的癌組織以及與癌組織鄰近的正常前列腺組織中XAF1 mRN

7、A和蛋白的表達(dá)。⑷將前列腺增生與前列腺癌作比較，通過免疫組織化學(xué)方法，觀察49例前列腺增生患者和26例原發(fā)前列腺癌患者組織切片中XAF1蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果：①逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測(cè)分析。通過RT-PCR方法檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)在20例原發(fā)前列腺癌患者中有18例XAF1mRNA在癌組織中的表達(dá)水平遠(yuǎn)低于其在與癌組織鄰近的正常前列腺組織中的表達(dá)水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；另有1例XAF1 mRNA在兩種組織標(biāo)

8、本中的表達(dá)水平相當(dāng)，1例XAF1 mRNA在癌組織中的表達(dá)水平略高于其在與癌組織鄰近的正常前列腺組織中。②蛋白印跡(Western bolt)檢測(cè)分析。通過Western bolt方法檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)在20例原發(fā)前列腺癌患者中有16列XAF1蛋白在癌組織中的表達(dá)水平遠(yuǎn)低于其在與癌組織鄰近的正常前列腺組織中的表達(dá)水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；另有2例XAF1蛋白在兩種組織中的表達(dá)水平相當(dāng)，2例XAF1蛋白在癌組織中的表達(dá)水平略高于其在

9、與癌組織鄰近的正常前列腺組織。③免疫組織化學(xué)(Immunohistochemistry)檢測(cè)分析。對(duì)49例前列腺增生患者和26例原發(fā)前列腺癌患者的組織切片進(jìn)行XAF1特異性染色。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，49例前列腺增生患者中有45例患者的組織切片存在XAF1細(xì)胞漿染色的強(qiáng)表達(dá)和細(xì)胞核染色的弱表達(dá)；但在26例原發(fā)前列腺癌患者中有23例患者的組織切片XAF1在細(xì)胞漿和細(xì)胞核中均未見明顯表達(dá)，表達(dá)均為陰性。
　　 結(jié)論：前列腺癌中凋亡促進(jìn)因子XAF