腦膠質(zhì)瘤免疫治療的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分大鼠RNA疫苗免疫治療的實(shí)驗(yàn)研究 目的:研究樹突狀細(xì)胞疫苗對C6荷瘤大鼠的免疫治療效應(yīng)，并比較免疫治療策略的異同。 方法:將成年健康SD大鼠分成4組，分別經(jīng)RNA致敏和C6凍融抗原致敏的DC免疫、對照組經(jīng)未致敏DC和RPMI1640免疫，采用LDH試劑盒檢測CTL的體外殺傷活性。建立大鼠C6腦膠質(zhì)瘤顱內(nèi)腫瘤模型，觀察大鼠的生存期，并進(jìn)行了病理學(xué)檢查。 結(jié)果:腫瘤RNA致敏的DC疫苗活性最強(qiáng)，和C6凍融抗原

2、致敏的DC疫苗相比，CTL殺傷活性差異沒有顯著性(P＞0.05)，與對照組相比差異有非常顯著性(P＜0.01)。治療組荷瘤大鼠生存時(shí)間與對照組相比，差異有非常顯著性(P＜0.01)，兩治療組之間差異沒有顯著性(P＞0.05)。HE染色治療組腫瘤生長明顯抑制。 結(jié)論:C6凍融抗原和腫瘤細(xì)胞RNA致敏的樹突狀細(xì)胞疫苗是有效的免疫治療方法，它們之間沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 第二部分免疫治療的途徑一、樹突狀細(xì)胞瘤內(nèi)注射治療腦膠質(zhì)瘤的實(shí)

3、驗(yàn)研究 目的:研究樹突狀細(xì)胞疫苗瘤內(nèi)注射對膠質(zhì)瘤的治療作用。 方法:建立大鼠C6腦膠質(zhì)瘤皮下和顱內(nèi)腫瘤模型，通過瘤內(nèi)注射樹突狀細(xì)胞(DC)、腹部皮下注射DC、對照組，觀察腫瘤生長情況和大鼠生存時(shí)間，比較細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)的活性，并進(jìn)行了病理學(xué)檢查。 結(jié)果:治療組的大鼠表現(xiàn)出腫瘤生長的部分抑制，生存時(shí)間明顯延長，和對照組相比，差異有非常顯著性(P＜0.01)，瘤內(nèi)注射DC和腹部皮下注射C6凍融抗原致敏DC

4、兩治療組之間的差異無顯著性(P=0.60)；CTL殺傷活性增強(qiáng)，和對照組相比差異有顯著性(P＜0.05)。雙側(cè)皮下種植的腫瘤治療一側(cè)后，生長均得到了抑制，并逐漸縮小。 結(jié)論:瘤內(nèi)注射DC治療腦膠質(zhì)瘤是一種新的、有效的免疫治療策略。 免疫治療膠質(zhì)瘤二、樹突狀細(xì)胞瘤內(nèi)注射和化療聯(lián)合治療腦膠質(zhì)瘤的實(shí)驗(yàn)研究 目的:研究樹突狀細(xì)胞疫苗和化療對膠質(zhì)瘤的協(xié)同作用。 方法:建立大鼠C6腦膠質(zhì)瘤皮下和顱內(nèi)腫瘤模型，聯(lián)合瘤

5、內(nèi)注射樹突狀細(xì)胞和化療，觀察腫瘤生長情況和大鼠生存時(shí)間，比較細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL)的活性，并進(jìn)行了病理學(xué)檢查。 結(jié)果:聯(lián)合治療的大鼠表現(xiàn)出腫瘤生長的完全抑制，生存時(shí)間明顯延長，與瘤內(nèi)注射DC相比，差異有顯著性(P＜0.05)，和化療組相比，差異有非常顯著性(P＜0.01)，CTL殺傷活性最強(qiáng)，和瘤內(nèi)注射組相比，差異有非常顯著性(P＜0.01)。雙側(cè)皮下種植腫瘤的模型治療一側(cè)后，兩側(cè)的腫瘤生長均得到抑制。 結(jié)論:瘤內(nèi)注射

6、DC和化療聯(lián)合治療腦膠質(zhì)瘤是一種新的、有效的免疫治療策略。 第三部分綠色熒光蛋白基因?qū)渫粻罴?xì)胞功能的研究 目的:研究瘤內(nèi)注射的樹突狀細(xì)胞的遷移及在腫瘤局部的作用。 方法:建立大鼠C6腦膠質(zhì)瘤顱內(nèi)腫瘤模型，脂質(zhì)體介導(dǎo)的增強(qiáng)綠色熒光蛋白(EGFP)基因轉(zhuǎn)染DC細(xì)胞，瘤內(nèi)注射后取大鼠同側(cè)的淋巴結(jié)在熒光顯微鏡下檢測DC，并用流式細(xì)胞儀檢測腫瘤周圍CD4+T和CD8+T的浸潤。 結(jié)果:同側(cè)的頸深部淋巴結(jié)可見大量