干細胞基因OCT4過表達對胃癌細胞侵襲遷移的影響研究.pdf

1、目的:構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)過表達干細胞基因OCT4的胃癌細胞株。研究過表達干細胞基因OCT4對胃癌細胞的生物學特性的改變，并探討改變這些生物學特性的作用機制。
　　方法：構(gòu)建攜帶OCT4基因的重組質(zhì)粒，用慢病毒載體感染SGC-7901得到穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株。Transwell細胞侵襲和遷移實驗、細胞劃痕實驗、細胞增殖實驗，分別檢測過表達OCT4對胃癌細胞的侵襲、遷移及增殖能力的影響。.利用熒光定量PCR、細胞免疫組化、Western–Blot檢測過表

2、達OCT4的胃癌細胞中Wnt信號通路基因及胃癌干細胞標志基因表達情況。裸鼠體內(nèi)成瘤實驗，檢測過表達OCT4的胃癌細胞的致瘤性。
　　結(jié)果：成功構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)過表達OCT4基因的胃癌細胞株。Transwell細胞侵襲及遷移實驗檢測提示：過表達OCT4基因的胃癌細胞的侵襲遷移能力明顯增強，與空白組及陰性對照組比較，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。細胞劃痕實驗提示：過表達 OCT4基因的胃癌細胞的遷移能力明顯增強，與空白組及陰性對照組比較

3、，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。MTs實驗檢測表明：過表達OCT4基因的胃癌細胞的增殖能力增強，與空白組及陰性對照組比較，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。熒光定量PCR、細胞免疫組化、Western–blot實驗結(jié)果示：過表達OCT4基因的胃癌細胞的OCT4、Sox2、β-catenin、Wnt3相對表達水平都有不同程度的升高，與空白組及陰性對照組比較，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。熒光定量PCR檢測過表達基因OCT4的

4、胃癌細胞C-myc、Klf4、CD44無明顯變化，與空白組及陰性對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。裸鼠體外成瘤實驗，提示過表達OCT4的胃癌細胞的致瘤性增強，瘤體大小及瘤體重量明顯增大，與空白組及陰性對照組比較，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：胃癌細胞過表達OC T4基因具有促進胃癌細胞的惡性侵襲遷移、增殖能力及致瘤性。表明OCT4基因在胃癌細胞的惡性侵襲遷移、增殖及致瘤方面發(fā)揮重要的作用。過表達OCT