人參皂苷Rb1干預(yù)術(shù)后疲勞綜合征大鼠蛋白質(zhì)代謝的研究.pdf

1、目的：
　　1.研究術(shù)后疲勞綜合征(Postoperative Fatigue Syndrome，POFS)大鼠模型AMPK信號(hào)通路影響蛋白質(zhì)代謝相關(guān)分子變化規(guī)律。
　　2.觀察在應(yīng)用人參皂苷Rb1(Ginsenoside Rb1)干預(yù)后，AMPK信號(hào)通路上影響蛋白質(zhì)代謝相關(guān)分子變化特點(diǎn)。
　　方法：
　　1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF級(jí)SD雄性青年大鼠，體重(200-300g)，北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司（SCXK（京

2、）2006-0009)。
　　2.方法和檢測(cè)指標(biāo)將雄性SD大鼠，稱重標(biāo)號(hào)隨機(jī)分為假手術(shù)對(duì)照組（C組），POFS模型組（M組）和人參皂苷Rb1干預(yù)組（R組）。每組再按時(shí)間點(diǎn)分為術(shù)后1、3、5、7天組，C組和M組大鼠分別在術(shù)前3天分別到取材當(dāng)天，每天腹腔注射1次4ml/kg體重的生理鹽水，R組大鼠在相同條件下腹腔注射4ml/kg體重的人參皂苷Rb1，人參皂苷Rb1用生理鹽水配置成3.75g/L的溶液現(xiàn)配現(xiàn)用。通過(guò)Real-time P

3、CR檢測(cè)術(shù)后第1、3天組大鼠肝臟組織和骨骼肌AMPK信號(hào)通路中ACC1，ACC2，F(xiàn)OXO1，MURF1，EEF2，p70s6k mRNA表達(dá)量的變化。通過(guò)Western Blot檢測(cè)術(shù)后1、3、5、7天組ACC，F(xiàn)OXO1，MURF1，EEF2，p70s6k蛋白表達(dá)。
　　采用Spss19統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（z±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析(One-Way ANOVA)，P＜0.05是認(rèn)為差異

4、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1.MURF1 mRNA表達(dá)量變化
　　與C組比，M組骨骼肌MURF mRNA表達(dá)量升高(1d、3d，P＜0.05); R組與M組比，注射人參皂苷Rb1后骨骼肌MURF mRNA表達(dá)量降低(1d、3d，P＜0.05)，而肝組織中則無(wú)上述變化。如圖1.1，1.2。
　　2.FOXO1 mRNA表達(dá)量變化
　　與C組比，M組骨骼肌FOXO1 mRNA表達(dá)量升高(1d、3d，P＜0

5、.05);R組與M組比，注射人參皂苷Rb1后骨骼肌FOXO1 mRNA表達(dá)量降低(1d、3d，P＜0.05)，而肝組織中則無(wú)上述變化。如圖1.3，1.4。
　　3.EEF2、p70S6KmRNA表達(dá)量變化
　　3.1 骨骼肌中:EEF2、p70S6K mRNA相對(duì)表達(dá)量M組相對(duì)于C組升高(1d、3d，P＜0.0.5)，應(yīng)用人參皂苷Rb1干預(yù)后R組相對(duì)于M組降低(1d，3d，P＜0.0.5)。如圖1.5，1.6，1.7，1.8

6、。
　　3.2 肝臟中:EEF2、p70S6KmRNA相對(duì)表達(dá)量M組相對(duì)于C組升高(1d、3d，P＜0.0.5)，應(yīng)用人參皂苷Rb1干預(yù)后R組相對(duì)于M組降低(1d、3d，P＜0.0.5)。如圖2.1，2.2，2.3，2.4。
　　4.ACC1、ACC2 mRNA表達(dá)量變化
　　4.1 在骨骼肌中:ACC1、ACC2 mRNA相對(duì)表達(dá)量M組相對(duì)于C組增加(1d，P＜0.0.5)，R組相對(duì)于M組降低(1d，P＜0.0.5)

7、。如圖1.9，1.10。
　　4.2 在肝臟中:ACC1、ACC2 mRNA相對(duì)表達(dá)量，M組相對(duì)于C組升高(1d，P＜0.0.5)，應(yīng)用人參皂苷Rb1干預(yù)后R組相對(duì)于M組升高(1d，P＜0.0.5);ACC1、ACC2 mRNA相對(duì)表達(dá)量M組相對(duì)于C組降低(3d，P＜0.0.5)，應(yīng)用人參皂苷Rb1干預(yù)后R組相對(duì)于M組降低(3d，P＜0.0.5)。如圖2.5,2.6,2.7,2.8。
　　5.Western blotting

8、結(jié)果
　　結(jié)果顯示ACC蛋白表達(dá)量隨時(shí)間(1d、3d、5d、7d)延長(zhǎng)而增加。相對(duì)于C組，M組大鼠骨骼肌ACC蛋白表達(dá)在術(shù)后明顯升高，相對(duì)于M組，R組蛋白表達(dá)下降。而ACC/P-ACC蛋白表達(dá)量，M組最高，R組少于M組。FOXO1蛋白表達(dá)量隨時(shí)間(1d、3d、5d、7d)延長(zhǎng)而增加，而P-FOXO1蛋白表達(dá)量隨時(shí)間(1d、3d、5d、7d)延長(zhǎng)而減少。C組、M組、R組FOXO1蛋白表達(dá)量，M組最高，R組少于M組。如圖3.2。EEF

9、2、p70S6K蛋白表達(dá)量。C組、M組、R組EEF2、p70S6K蛋白表達(dá)量，M組高于C組，R組未見明顯差別(1d、3d、5d、7d)。如圖3.3。
　　結(jié)論:
　　1.術(shù)后疲勞綜合征大鼠相關(guān)分子的表達(dá)相對(duì)于假手術(shù)對(duì)照組表達(dá)有一定規(guī)律，骨骼肌通過(guò)MURF1、FOXO1、EEF2、p70S6K、ACC1、ACC2表達(dá)量變化，抑制蛋白質(zhì)的合成和促進(jìn)降解，減少能量消耗。肝臟通過(guò)EEF2、p70S6K、、ACC1、ACC2表達(dá)量變化