多囊卵巢綜合征的病因及其治療的研究.pdf

1、研究背景:多囊卵巢綜合征(PCOS)是育齡婦女常見的一種內(nèi)分泌失調(diào)和生殖功能障礙性疾病，臨床表現(xiàn)主要為閉經(jīng)，不孕，多毛和肥胖等，且伴有胰島素抵抗，高胰島素血癥和高脂血癥等代謝異常，目前認為是代謝綜合征的一種。其發(fā)病原因至今不清，因其發(fā)病的家族聚集性，提示該病的發(fā)病與遺傳因素有關。較多的研究提示，該病可能與多種基因異常有關，已經(jīng)有發(fā)現(xiàn)芳香化酶基因、胰島素基因、脂聯(lián)素基因等多種基因可能參與PCOS的發(fā)病。多基因可能協(xié)同作用，從而引起一系列異

2、常的病理生理改變。促生長激素釋放激素受體配體(Ghrelin)是一個于1999年由日本Kojima新發(fā)現(xiàn)的由28個氨基酸組成的一種腦一腸肽，是生長激素促分泌劑受體(GHS-R)的內(nèi)源性配體。除能促進生長素分泌外，還具有廣泛其他生物學效應，包括刺激食欲，刺激胃蠕動和胃酸分泌，控制能量平衡以及影響胰腺的內(nèi)分泌功能及糖代謝。還有研究認為其還能刺激催乳素和促腎上腺皮質激素釋放，參與人和大白鼠睪丸組織促性腺激素軸的調(diào)控，可能直接抑制中樞LH分泌，

3、減少T分泌。近年來認為Ghrelin在調(diào)節(jié)能量代謝，影響胰腺的內(nèi)分泌功能和糖代謝方面所起作用日益重要。因而它與肥胖，2型糖尿病等代謝綜合征的發(fā)病密切相關。PCOS作為代謝綜合征的一種，Ghrelin是否也在其發(fā)生發(fā)展中起作用?盡管有研究觀察PCOS患者血漿Ghrelin水平的變化，并有觀察Ghrelin基因多態(tài)與肥胖和2型糖尿病有關，但同時綜合Ghrelin血清水平及其基因多態(tài)在PCOS發(fā)病中的作用，目前尚無研究。因此本研究擬通過檢測P

4、COS患者血清Ghrelin水平，同時通過對Ghrelin基因三個SNPrs27647，rs26802，以及rs2075356位點的多態(tài)與PCOS不同表型相關性的研究，探討Ghrelin在PCOS發(fā)病及病理生理變化中的作用。 目的:①通過測定PCOS患者及正常對照血清Ghrelin水平，分析血清Ghrelin水平與內(nèi)分泌激素，胰島素及胰島素抵抗指標、其他各臨床指標的相關性，同時探討PCOS患者測定血清Ghrelin水平的意義。②

5、通過分析Ghrelin基因位點rs27647，rs26802，以及rs2075356在PCOS和正常對照之間基因型和等位基因頻率的差異，研究上述三位點的SNP多態(tài)與PCOS不同表型的相關性，探討Ghrelin基因在PCOS發(fā)病中的作用。 方法:依據(jù)2003年鹿特丹標準選擇PCOS患者48例，同期選擇正常對照40例，分別分為肥胖和非肥胖組，胰島素抵抗組和非胰島素抵抗組。測定所有研究對象的血清Ghrelin水平和內(nèi)分泌激素，空腹血糖

6、，胰島素，血脂等指標，同時測量身高，體重，腰圍和臀圍，計算體重指數(shù)(BMI)，腰臀比例(wHR)，穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)，穩(wěn)態(tài)模型胰島B細胞分泌指數(shù)(HOMA-IS)，以及胰島素敏感指數(shù)(ISI)。相同標準選擇PCOS患者285例，同期選擇正常對照260例，分別測定身高，體重，腰圍，臀圍，測定內(nèi)分泌激素，空腹血糖，胰島素，血脂等指標。提取DNA，根據(jù)研究的Ghrelin基因的三個位點，設計相應的聚合酶鏈反應(PCR)引

7、物。rs27647和rs26802兩位點基因型測定采用PCR-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)方法，最后行電泳分析在凝膠成像系統(tǒng)下顯影。rs2075356位點SNP采用等位基因特異性PCR(AS-PCR)方法來測定基因型。 結果:①血清Ghrelin水平的測定結果：PCOS患者的血清Ghrelin水平明顯低于正常對照組，差異有顯著性。PCOS肥胖組血清Ghrelin水平明顯低于非肥胖組，正常對照肥胖組血清Ghrelin水

8、平明顯低于非肥胖組，差異均有顯著性。PCOS患者非肥胖組血清Ghrelin水平明顯低于對照非肥胖組，差異有顯著性；胰島素抵抗組血清Ghrelin水平明顯低于非胰島素抵抗組，差異具有顯著性。血清Ghrelin水平與BMI，WHR，空腹胰島素水平，HOMA-IR，HOMA-IS呈負相關，與ISI呈正相關?？刂艬MI影響后血清Ghrelin水平仍與空腹胰島素水平，HOMA-IR呈負相關，與ISI呈正相關。②Ghrelin基因SNPrs2680

9、2，rs27647，rs2075356在PCOS組和正常對照組的基因型分布及等位基因頻率均無顯著性差異。rs27647和rs2075356兩種SNP不同基因型PCOS婦女在臨床，內(nèi)分泌激素，血清Ghrelin水平及代謝指標方面均無差異。rs26802 PCOS患者從和AC基因型的BMI和WHR高于CC基因型，將AA和AC基因型合并后，BMI和WHR仍高于CC基因型。差異有統(tǒng)計學意義。而其他指標包括內(nèi)分泌激素及血清胰島素，血糖，HOMA-

10、IR，血清Ghrelin水平指標方面均無差異。 結論:①中國漢族PCOS患者存在低Ghrelin水平，血清Ghrelin水平與BMI，WHR，以及胰島素抵抗呈負相關，但與性激素和血脂無相關性。②Ghrelin基因SNPrs27647，rs2075356與PCOS臨床，內(nèi)分泌，代謝特征無相關性，SNPrs26802與PCOS患者內(nèi)分泌和胰島素抵抗無相關性，但與BMI和WHR有相關性。③血清Ghrelin水平與Ghrelin基因SN