葫蘆素E誘導(dǎo)CNE2細(xì)胞株凋亡及其分子機(jī)制的初步研究.pdf

1、目的:觀察葫蘆素E(Cucurbitacin E,CuE)對人鼻咽癌細(xì)胞株CNE2生長增殖及凋亡的影響,并探討其分子機(jī)制。
　　方法:采用MTT法,檢測CuE對體外培養(yǎng)的CNE2細(xì)胞株生長增殖的影響;AO/EB染色,觀察細(xì)胞的凋亡,并運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù),分析其凋亡率;應(yīng)用比色法和間接標(biāo)記法流式細(xì)胞術(shù),測定 CuE作用后CNE2細(xì)胞內(nèi)caspase-3酶活性、Bcl-2和Bax的表達(dá)。
　　結(jié)果:MTT檢測結(jié)果顯示:0.01umo

2、l/l~100umol/l濃度的CuE可抑制CNE2細(xì)胞生長,CuE的濃度越高,作用時(shí)間越長,其抑制作用越強(qiáng),呈現(xiàn)濃度和時(shí)間依賴性。AO/EB染色,熒光顯微鏡下可見到不同時(shí)期的凋亡細(xì)胞。流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn),0-100 umol/l濃度的CuE、作用48h,隨著CuE濃度的增高,CNE2細(xì)胞凋亡率增加, caspase-3酶活性增強(qiáng)。間接標(biāo)記法流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果,發(fā)現(xiàn)CNE2細(xì)胞經(jīng)CuE處理后,Bcl-2基因表達(dá)降低,Bax基因表達(dá)增