西維來司鈉對(duì)大鼠重癥急性胰腺炎治療作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：通過檢測重癥急性胰腺炎(SAP)大鼠血清中中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)、白介素-6(IL-6)的含量及肺、胰腺組織病理學(xué)觀察，研究西維來司鈉(Sivelestat)對(duì)大鼠SAP模型中胰腺及其并發(fā)急性肺損傷(ALI)的治療作用。 方法：SD大鼠54只，雌雄不限，體重250～280g(河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)，編號(hào)，隨機(jī)分為3組，其中A組為對(duì)照組(n=18)，B組為模型組(n=18)，C組為藥物治療組(n=18)。每實(shí)驗(yàn)

2、組又分3個(gè)時(shí)間點(diǎn)，為3h、6h、12h亞組，每時(shí)間點(diǎn)6只。本實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M采用經(jīng)十二指腸乳頭逆行膽胰管注射5％?；悄懰徕c的方法制備大鼠SAP模型；藥物治療組在制備SAP大鼠模型前進(jìn)行右側(cè)頸靜脈穿刺置管，使用微量泵持續(xù)靜脈輸入西維來司鈉(5mg/100eCh)；對(duì)照組開腹，輕翻動(dòng)胰腺，對(duì)照組和模型組頸靜脈持續(xù)靜注與治療組等量等速度的生理鹽水(0.5ml/100g/h)。在模型制備完成后3h、6h和12h時(shí)間點(diǎn)，各組分別處死6只大鼠。切取胰腺及

3、肺臟，觀察胰腺、肺臟大體標(biāo)本，留取部分胰腺組織和左肺上葉組織制備組織切片行HE染色，進(jìn)行組織學(xué)觀察及組織病理學(xué)評(píng)分；計(jì)算胰腺及肺組織的濕/干重比；用紗布法計(jì)算腹腔積液重量；留取血清應(yīng)用自動(dòng)生化分析儀測血清淀粉酶含量，應(yīng)用ELISA方法測定血清中NE、IL-6的含量；右肺灌沈回收支氣管肺泡灌沈液(BALF)，應(yīng)用ELISA方法測定BALF中NE的含量。結(jié)果： 1.組織病理觀察：(1)胰腺及腹腔：A組為正常胰腺組織，未見腹水；B組大

4、鼠腹腔內(nèi)可見大量混濁血性腹水，胃腸擴(kuò)張明顯，大網(wǎng)膜、腸系膜可見皂化斑，胰腺腫脹、灶狀或片狀出血壞死灶，光鏡下見胰腺腺泡細(xì)胞腫脹壞死，融合成大片狀，間質(zhì)有出血、水腫并有中性粒細(xì)胞及單核細(xì)胞浸潤明顯；C組見少量腹水，胰腺腫脹，光鏡下見少量炎癥細(xì)胞浸潤，可見點(diǎn)狀壞死灶。(2)肺臟及胸腔：A組為正常肺臟組織，未見胸水；B組胸膜局部粘連并有少量胸水，肺組織水腫，表面散在出血點(diǎn)，光鏡下見肺泡壁破裂，肺間質(zhì)充血、水腫、明顯增厚，肺泡和肺間質(zhì)中有大量的

5、炎癥細(xì)胞浸潤；C組未見胸水，肺組織無明顯水腫，組織表面未見出血點(diǎn)，光鏡下見肺間質(zhì)充血、水腫、增厚不明顯，見較少炎性細(xì)胞浸潤。 2.組織病理學(xué)評(píng)分結(jié)果：(1)胰腺：B組隨時(shí)間延長損傷程度加重，各時(shí)間點(diǎn)間差異具有顯著性(P＜0.05)，與A組相比在各時(shí)間點(diǎn)損傷程度均加重，差異有顯著性(P＜0.05)；C組胰腺損傷的組織病理學(xué)評(píng)分在各時(shí)間點(diǎn)與B組相比均降低，差異有顯著性(P＜0.05)。(2)肺臟：B組隨時(shí)間延長損傷程度加重，各時(shí)間點(diǎn)

6、間差異具有顯著性(P＜0.05)，并且評(píng)分在各時(shí)間點(diǎn)與A組相比增加，差異具有顯著性(P＜0.05)；C組肺損傷程度較B組減輕，組織病理學(xué)評(píng)分在各時(shí)間點(diǎn)與B組相比均降低，差異有顯著性(P＜0.05)。 3.胰腺、肺臟濕/干重比測定結(jié)果：(1)胰腺濕/干重比：B組各時(shí)間點(diǎn)較A組同時(shí)間點(diǎn)值升高，其差異有顯著性(P＜0.05)；C組6h、12h時(shí)間點(diǎn)較B組同時(shí)間點(diǎn)值降低，差異有顯著性(P＜0.05)，3h時(shí)間點(diǎn)與B組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

7、＞0.05)；(2)肺臟濕/干重比：B組各時(shí)間點(diǎn)較A組同時(shí)間點(diǎn)值明顯升高，其差異有顯著性(P＜0.05)；C組6h、12h時(shí)間點(diǎn)較B組同時(shí)間點(diǎn)降低，差異有顯著性(P＜0.05)，3h時(shí)間點(diǎn)與B組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。 4腹腔積液重量比較：A組未見腹腔積液；B組各時(shí)間點(diǎn)腹腔積液重量隨時(shí)間延長而增加，差異具有顯著性(P＜0.05)；C組各時(shí)間點(diǎn)較B組同時(shí)間點(diǎn)腹腔積液重量減少，差異具有顯著性(P＜0.05)。 5血清淀粉酶

8、測定結(jié)果：B組各時(shí)間點(diǎn)血清淀粉酶值較A組有明顯升高，差異具有顯著性(P＜0.05.)，C組3h、6h時(shí)間點(diǎn)血清淀粉酶值與B組同時(shí)間點(diǎn)的值比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，12h時(shí)間點(diǎn)血清淀粉酶值較B組值降低，差異具有顯著性(P＜0.05)。 6 細(xì)胞因子測定結(jié)果：(1)NE含量：B組血清及BALF中NE含量在各時(shí)間點(diǎn)較A組均明顯升高，差異具有顯著性(P＜0.05)；B組血清及BALF中NE含量在各時(shí)間點(diǎn)間隨時(shí)間延長而增加，差異

9、具有顯著性(P＜0.05)；C組各時(shí)間點(diǎn)的NE含量較B組同時(shí)間點(diǎn)均降低，差異具有顯著性(P＜0.05)。(2)IL-6含量：B組血清IL-6含量各時(shí)間點(diǎn)較A組均升高，差異具有顯著性(P＜0.05)；B組血清IL-6含量各時(shí)間點(diǎn)間隨時(shí)間延長而增加，差異具有顯著性(P＜0.05)；C組血清IL-6各時(shí)間點(diǎn)的含量較B組同時(shí)間點(diǎn)均降低，差異具有顯著性(P＜0.05)。 7相關(guān)性分析：B組中，BALF中NE含量與肺組織病理學(xué)評(píng)分相關(guān)系數(shù)r

10、=0.807，P＜0.05；血清NE含量與肺組織病理學(xué)評(píng)分相關(guān)系數(shù)r=0.781，P＜0.05；血清NE含量與胰腺組織病理學(xué)評(píng)分相關(guān)系數(shù)r=0.779，P＜0.05；血清IL-6含量與胰腺組織病理學(xué)評(píng)分相關(guān)系數(shù)r=0.745，P＜0.05。此結(jié)果表明，血清與BALF中NE含量與肺臟組織病理學(xué)評(píng)分之間具有正相關(guān)關(guān)系；血清中NE、IL-6含量與胰腺組織病理學(xué)評(píng)分之間具有正相關(guān)關(guān)系。結(jié)論： 1.應(yīng)用經(jīng)十二指腸乳頭逆行膽胰管注射5％牛磺