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文檔簡介
1、【目的】IL-10在腦缺血后的神經保護作用已普遍被國內外學者接受。本研究采用建立大腦中動脈閉塞(MCAO)模型后1小時對SD大鼠側腦室注射重組IL-10過表達慢病毒載體(促進1L-10表達)和重組IL-10-RNAi慢病毒載體(抑制IL-10表達),觀察大鼠神經損傷情況,檢測傷側腦組織中IL-10水平以及腦組織中Nestin、DCX表達情況,探討IL-10對腦缺血大鼠神經再生機制。
【方法】
1、重組IL-10過表達
2、慢病毒載體以及重組IL-10-RNAi慢病毒載體的構建和包裝。
2、采用線栓法建立大鼠MCAO腦缺血模型。重組IL-10過表達慢病毒載體(促進1L-10表達)和重組IL-10-RNAi慢病毒載體(抑制IL-10表達)用PBS溶解后于造模后1小時經側腦室注射進行干預。采用ELISA檢測IL-10表達情況,判斷慢病毒轉染是否成功。
3、采用Longa5分制NDS法、修正的神經行為學評分(mNSS)和改良貼紙去除試驗評價各
3、組大鼠神經功能變化。TTC染色并計算腦梗死體積判斷腦缺血后IL-10是否具有抑制凋亡作用。
4、造模7天后取腦,經Western-Blot檢測Nestin、DCX表達情況。
【結果】
1、ELISA結果顯示,重組 IL-10過表達慢病毒載體干預后大鼠腦組織 IL-10表達增加,重組IL-10-RNAi慢病毒載體干預后則減少,提示兩者均成功轉染SD大鼠。
2、重組IL-10過表達慢病毒載體干預MCA
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