血管緊張素Ⅱ?qū)ρ芷交〖?xì)胞凋亡的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的: 觀察AngII對(duì)體外培養(yǎng)的大鼠胸主動(dòng)脈VSMCs凋亡的影響，探討其可能機(jī)制。
　　 方法: 大鼠胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代培養(yǎng)（植塊培養(yǎng)法），建立VSMCs體外培養(yǎng)模型，取3～5代細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)分組：正常對(duì)照組、Val (10 μmol/L)組、Val (10 μmol/L)+AngII (100 μmol/L)組和AngII (100 μmol/L)組，培養(yǎng)24h后DAPI檢測(cè)細(xì)胞凋亡形態(tài)及細(xì)胞凋亡率，RT-PCR法檢

2、測(cè)各組AT1R mRNA表達(dá)水平，Western Blot法檢測(cè)Bax、Bcl-2及Caspase3的表達(dá)。
　　 結(jié)果;
　　 (1) 培養(yǎng)的VSMCs生長(zhǎng)良好，光鏡下呈長(zhǎng)梭形及“峰與谷”樣生長(zhǎng)。SM α-actin免疫組化的結(jié)果顯示所得的細(xì)胞為典型的VSMCs；
　　 (2) AngII 對(duì)VSMCs具有促凋亡作用，該作用呈時(shí)間及劑量的依賴(lài)性：正常情況下VSMCs凋亡率約為2.12％，當(dāng)濃度為10 μmol/

3、L、100 μmol/L時(shí)凋亡率分別為10.36±0.66％、14.03±0.92％，與對(duì)照組相比有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；10 μmol/L的AngII作用12h細(xì)胞凋亡率明顯上升，24h細(xì)胞凋亡達(dá)高峰，凋亡率約為11.20±0.94％，12、24、48組與對(duì)照組比較均有顯著性差異(P<0.05)；
　　 (3)與對(duì)照組相比較，AngII組AT1RmRNA表達(dá)明顯升高(1.687±0.189)，給予Val后，AT1Rm

4、RNA明顯下降(1.209±0.125vs1.687±0.189)，AngII組凋亡率約為13.12±0.91％，給予AT1R拮抗Val后，凋亡率降至7.65±0.44％(P<0.05)；
　　 (4) 與對(duì)照組相比，AngII組Bax（1.787±0.189）、Caspase3 （1.814±0.202）表達(dá)明顯增加，Val+AngII組Bax（1.406±0.134 vs 1.787±0.189）、Caspase3 （1.3