Wistar大鼠實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎軸索損害的病理學(xué)研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2009級(jí)碩士學(xué)位論文Wistar大鼠實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎軸索損害的病理學(xué)研究Pathologicalstudyonaxonalinjuryofaratmodelofexperimentalallergicencephalomyelitis課題來源：自選專業(yè)名稱學(xué)位申請(qǐng)人指導(dǎo)教師答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)成員神經(jīng)病學(xué)王圓圓劉曉加教授呂田明教授徐書雯教授王彤歌教授羅一峰教授王群教授周曙教授論文評(píng)閱人潘小平教授周亮教授2012

2、年3月20日廣州摘要學(xué)的重要特征。MS不同階段軸索損害的機(jī)制可能不同，疾病早期神經(jīng)功能障礙可能是由于炎性脫髓鞘造成的急性軸索損害引起的。炎癥條件下，各種炎性因子、一氧化氮、谷氨酸等毒性物質(zhì)的積累會(huì)造成髓鞘和軸索破壞，一旦軸索損害發(fā)展到閾值時(shí)預(yù)編程的進(jìn)行性神經(jīng)功能退行性變就會(huì)被觸發(fā)，因此我們應(yīng)該在MS早期階段積極抗炎治療和保護(hù)軸索治療，預(yù)防和延緩神經(jīng)功能殘疾的發(fā)生。晚期的神經(jīng)功能障礙則可能與慢性脫麓鞘斑塊中緩慢進(jìn)展的軸索損害有關(guān)。軸索損害

3、越重，MS的預(yù)后越差。由此可見，軸索損害可以發(fā)生在MS早期階段：軸索損害與患者永久性的神經(jīng)殘疾有關(guān)；軸索損害可以在MS緩解后的復(fù)發(fā)中發(fā)揮重要的作用；明確軸索損害的機(jī)制可以更好的指導(dǎo)MS的臨床治療策略。MS患者脫髓鞘斑塊形成的早期即可出現(xiàn)淀粉樣前體蛋白(amyloidprecursorprotein，APP)積聚，而APP積聚被認(rèn)為是軸索損害的一個(gè)特征性標(biāo)志，表明在患者脫髓鞘的同時(shí)軸索也受到損傷。神經(jīng)絲蛋白是軸索細(xì)胞骨架的主要組成成分，其

4、磷酸化反應(yīng)主要受髓鞘形成、髓鞘脫失和軸索的病理改變等影響。非磷酸化神經(jīng)絲蛋白(Nonphosphorylatedneurofilament，SMI32)多存在于神經(jīng)元細(xì)胞的胞體和樹突中，而有髓鞘包裹的正常軸索骨架中的神經(jīng)絲蛋白多是磷酸化的，磷酸化的神經(jīng)絲蛋白不會(huì)呈現(xiàn)SMI32染色陽性，因此當(dāng)發(fā)現(xiàn)大量SMI32染色陽性纖維時(shí)即可說明軸索損害已存在。因此本研究在成功建立Wistar大鼠EAE模型的基礎(chǔ)上通過不同的病理染色技術(shù)觀察EAE的炎癥

5、浸潤、髓鞘脫失和軸索損害的病理特征，重點(diǎn)探討MS軸索損害的特點(diǎn)及其發(fā)生機(jī)制，對(duì)深入探討MS的發(fā)病機(jī)制、指導(dǎo)臨床MS的診斷及治療具有重要意義。方法l、豚鼠處死后于無菌條件下分離脊髓，加入少量的生理鹽水研磨，制備新鮮的脊髓勻漿與等體積完全弗氏佐劑充分混合，配成抗原佐劑乳化液(GPSCHCFA)用于制備EAE動(dòng)物模型。2、EAE模型組大鼠分為三個(gè)亞組：EAE免疫后第4天組(EAE4d組)、EAE免疫后第14天組(EAE14d組)和EAE免疫后