巴柳氮鈉對實驗性末端回腸炎的防治作用及腸上皮細胞TLR2、TLR4的影響.pdf

1、目的：本研究通過回腸-盲腸側側吻合術建立大鼠實驗性末端回腸炎動物模型觀察巴柳氮鈉的防治作用及對腸上皮細胞TLR2、TLR4的影響。
　　方法：清潔級、雄性健康SD大鼠100只，隨機分為A-E五組：正常對照組（A）、造模對照組（B）、巴柳氮鈉50mg.kg-1.d-1組（C）、75mg.kg-1.d-1組（D）及100 mg.kg-1.d-1組（E），每組20只。B-E組分別行回腸末端-盲腸側側吻合術、A組只作腹腔注射麻醉。造模后2

2、周時，C-E組大鼠分別給予巴柳氮鈉50mg.kg-1.d-1、75mg.kg-1.d-1、100mg.kg-1.d-1懸液各1ml灌胃處理，A、B組予以生理鹽水1ml灌胃作為對照，期間觀察術后動物的一般狀態(tài)。術后第4、8周分批處死動物，取距吻合口1-3cm處末端回腸組織，行蘇木素－伊紅（hematoxylin-eosin staining, HE）染色，觀察五組大鼠末端回腸組織的病理變化，進行肉眼、鏡下炎癥評分（histopatholo

3、gical score,HS）及上皮間淋巴細胞（intraepithelial lymphocyte，IEL）計數(shù)。使用免疫組化（immunohistochemistry, IHC）染色（Elivison二步法）檢測各組末端回腸炎粘膜中TLR2、TLR4的表達情況。
　　結果：⑴實驗動物的一般情況術后3-5天，所有造模SD大鼠均出現(xiàn)一般狀況差，其中體重下降較明顯，此時造模組和巴柳氮鈉各組與正常對照組比較差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.

4、05）。2-4周各組體重逐步恢復,4周后各時期五組的體重下降無統(tǒng)計學意義( P>0.05)。⑵末端回腸組織肉眼組織病理學評分4周時，所有造模SD大鼠末端回腸組織肉眼觀均為以急性炎癥為主的表現(xiàn)，但造模組炎癥較巴柳氮鈉各組重，評分有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；隨著巴柳氮鈉灌胃劑量的增加，三組炎癥程度逐漸減輕，評分有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。8周時，造模組炎癥明顯，而巴柳氮鈉各組炎癥程度依次減輕，四組評分有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。⑶末端

5、回腸組織光鏡下組織病理學評分4周時，各手術組末端回腸組織鏡下觀均為急性炎癥為主的表現(xiàn)，B組的HS高于A、C、D、E組（P<0.05)；隨著巴柳氮鈉灌胃劑量的增加，三組炎癥程度依次減輕，評分有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。8周時，B、C-E組進入慢性炎癥表現(xiàn)，B組與A、C-E組相比，有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；而此時期 C-E組炎癥明顯減輕，三組相比有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。⑷末端回腸組織上皮間淋巴細胞計數(shù)4周時，B組上皮間淋巴細胞計

6、數(shù)高于A、C-E組（P<0.05）；C-E組上皮間淋巴細胞計數(shù)高于A組（P<0.05），隨著巴柳氮鈉灌胃劑量的增加，C-E三組間淋巴細胞計數(shù)依次降低（P<0.05）。8周時，B組鏡下以上皮間淋巴細胞浸潤粘膜及粘膜下層為主，與A、C-E組相比，有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。C-E組鏡下上皮間淋巴細胞計數(shù)依次減少，三組評分有統(tǒng)計學意義（P<0.05）,其中E組與A組相比，無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。⑸末端回腸組織TLR2、TLR4的表達4

7、周時，B組末端回腸組織TLR2、TLR4平均吸光度（A）值高于A、C-E組(P<0.05),C-E組TLR2、TLR4平均吸光度（A）值高于A組(P<0.05)，隨著巴柳氮鈉灌胃劑量的增大，C-E組TLR2、TLR4平均吸光度（A）值依次降低（P<0.05）。8周時，造模組 TLR2、TLR4的平均吸光度（A）值高于A、C-E組（P<0.05）；C-D組TLR2、TLR4的平均吸光度值高于A組(P<0.05)，而E組TLR2、TLR4的