ICOS共刺激通路參與角膜移植免疫排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文ICOS共刺激通路參與角膜移植免疫排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究姓名：袁偉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：免疫學(xué)指導(dǎo)教師：陸曉和20080606主塞摘要第一部分ICOS共刺激通路參與角膜移植免疫排斥反應(yīng)的研究目的通過(guò)建立大鼠同種異體穿透性角膜移植模型，研究ICOS共刺激通路與角膜移植急性免疫排斥反應(yīng)的關(guān)系。方法取健康清潔級(jí)Wistar大鼠及SD大鼠，分為移植組和正常對(duì)照組。移植組以10只Wistar大鼠為供體，20只SD大鼠為受體，

2、建立同種異體穿透性角膜移植模型；對(duì)照組為5只健康清潔級(jí)正常SD大鼠(10眼)。移植術(shù)后每日在裂隙燈顯微鏡下觀察角膜植片情況，并對(duì)角膜混濁、水腫、新生血管3項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行評(píng)分。分別于術(shù)后7天、14天取植片進(jìn)行病理學(xué)觀察，并采用RTPCR法檢測(cè)植片組織ICOSmRNA的表達(dá)情況，免疫組織化學(xué)法檢測(cè)植片組織ICOS蛋白水平；同時(shí)采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血CD3ICOST／CD3T的表達(dá)情況，并以正常大鼠作對(duì)照。結(jié)果(1)術(shù)后觀察：大鼠同種異體穿透性

3、角膜移植術(shù)后7天均未發(fā)生排斥反應(yīng)，術(shù)后第9天開(kāi)始有大鼠植片發(fā)生排斥反應(yīng)，至術(shù)后14天時(shí)角膜植片皆已發(fā)生不同程度的排斥反應(yīng)。(2)IIE染色結(jié)果：移植術(shù)后7天時(shí)角膜植片水腫增厚，基質(zhì)纖維排列紊亂，縫線及切口周?chē)霈F(xiàn)大量單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，植片中央也可見(jiàn)散在的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，術(shù)后14天較術(shù)后7天更為明顯。炎性細(xì)胞主要存在于上皮層和淺層基質(zhì)。(3)ICOS蛋白表達(dá)情況：細(xì)胞膜、細(xì)胞漿呈棕黃色染色者為ICOS陽(yáng)性細(xì)胞。正常大鼠角膜組織各層均無(wú)