氟伐他汀對糖尿病大鼠睪丸損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的:通過建立雄性糖尿病大鼠生殖損傷的模型，觀察氟伐他汀對糖尿病大鼠睪丸損傷的保護(hù)作用，并探討氟伐他汀對糖尿病大鼠睪丸損傷保護(hù)作用的可能機(jī)制。
　　方法:選用SPF級雄性SD大鼠86只，隨機(jī)取10只做為正常對照組，其余大鼠均腹腔注射STZ（65mg/kg）誘導(dǎo)糖尿病大鼠模型。將造模成功大鼠按血糖、體重均勻分為糖尿病模型對照組(DM)、氟伐他?。?、18mg/kg）組和胰島素組。氟伐他汀組每天灌胃1次，正常對照組及糖尿病模型組給予等

2、體積生理鹽水灌胃，胰島素組給予精蛋白鋅胰島素皮下注射2U·kg-1·d-1，連續(xù)給藥8周。8周末，處死動物，留取血清及睪丸組織，行血清睪酮（T）、睪丸組織MDA、SOD、GSH-Px檢測，并在光鏡下觀察HE染色、TUNEL染色及免疫組織化學(xué)(Bcl-2,Bax)等指標(biāo)，透射電鏡下觀察睪丸組織超微結(jié)構(gòu)改變。
　　結(jié)果:
　　1.氟伐他汀對糖尿病大鼠一般情況的影響：實(shí)驗(yàn)期間，糖尿病模型組大鼠除“三多一少”現(xiàn)象外，還出現(xiàn)多系統(tǒng)并發(fā)

3、癥的表現(xiàn)，死亡較多（41.6％）；與糖尿病組比較，氟伐他汀各劑量組對外界反應(yīng)相對靈敏，并發(fā)癥程度較輕，死亡相對較少（36.4%和27.3%）；胰島素組大鼠的一般情況明顯改善，死亡較少（27.3%）。
　　2.氟伐他汀對糖尿病大鼠血糖、體重的影響：經(jīng)8周藥物干預(yù)后，糖尿病組大鼠空腹血糖顯著高于正常組（P＜0.01）；氟伐他汀各組空腹血糖較糖尿病組有不同程度的下降（P＜0.01）；胰島素組與正常組空腹血糖無顯著性差異（P＞0.05）。

4、與正常組相比，糖尿病組大鼠體重顯著減輕（P＜0.01）；氟伐他汀各組與糖尿病組大鼠體重?zé)o顯著性差異（P＞0.05）；胰島素組大鼠體重較糖尿病組顯著增加（P＜0.01），但不及正常組（P＜0.01）。
　　3.氟伐他汀對糖尿病大鼠睪丸質(zhì)量、睪丸臟器系數(shù)的影響：糖尿病組大鼠睪丸質(zhì)量、臟器系數(shù)較正常組顯著降低（P＜0.01）；氟伐他汀各組睪丸質(zhì)量及臟器系數(shù)高于糖尿病組，且18mg/kg組與糖尿病組存在顯著性差異（P＜0.01）；胰島素組

5、大鼠睪丸質(zhì)量低于正常組（P＜0.01），但兩組臟器系數(shù)無顯著性差異（P＞0.05）。
　　4.氟伐他汀對糖尿病大鼠精子參數(shù)的影響：糖尿病組大鼠精子數(shù)量、精子活率顯著少于正常組（P＜0.01）；氟伐他汀6mg/kg組精子數(shù)量、精子活率與糖尿病組無顯著性差異（P＞0.05），氟伐他汀18mg/kg組精子數(shù)量、精子活率均較糖尿病組顯著增高（P＜0.05或P＜0.01），但不及胰島素組（P＜0.01）。胰島素組精子數(shù)量、精子活率低于正常組

6、（P＜0.01）。
　　5.氟伐他汀對糖尿病大鼠睪丸組織HE染色的影響：光鏡下，正常組大鼠睪丸曲細(xì)精管飽滿，各級生精細(xì)胞排列整齊，管腔內(nèi)可見密集精子；糖尿病模型組大鼠曲細(xì)精管明顯萎縮，生精細(xì)胞脫落、數(shù)量顯著減少，大部分管腔內(nèi)未見精子；氟伐他汀組曲細(xì)精管結(jié)構(gòu)基本完整，6mg/kg組管腔內(nèi)可見精子細(xì)胞核分裂像，18mg/kg組管腔內(nèi)可見少量精子；胰島素組曲細(xì)精管及各級生精細(xì)胞形態(tài)基本正常，管腔內(nèi)可見較多精子。
　　6.氟伐他汀對

7、糖尿病大鼠睪丸生精細(xì)胞TUNEL染色的影響：凋亡細(xì)胞表達(dá)糖尿病組最多，并顯著高于其余各組（P＜0.01）；氟伐他汀干預(yù)后，凋亡生精細(xì)胞數(shù)量較糖尿病組明顯減少（P＜0.01），且18mg/kg組優(yōu)于6mg/kg組，但不及胰島素組；胰島素組凋亡細(xì)胞數(shù)量與正常組相近（P＞0.05）。
　　7.氟伐他汀對糖尿病大鼠睪丸組織電鏡下超微結(jié)構(gòu)的影響：糖尿病組大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞體積縮小，細(xì)胞質(zhì)減少，線粒體減少、嵴溶解，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，脂滴增加，間質(zhì)細(xì)胞

8、核固縮，染色質(zhì)呈塊狀濃集；間質(zhì)微血管內(nèi)皮細(xì)胞增生、腫脹，基底膜顯著增厚，可見大量纖維素樣物質(zhì)沉積。氟伐他汀組間質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞器增多，線粒體嵴結(jié)構(gòu)較清晰，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)增多，脂滴減少，細(xì)胞核染色質(zhì)濃集、邊集現(xiàn)象好轉(zhuǎn)；間質(zhì)微血管管腔通暢，血管內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)明顯好轉(zhuǎn)，血管基底膜增厚現(xiàn)象明顯減輕，纖維素樣沉積明顯減少，且18mg/kg組優(yōu)于6mg/kg組，接近于正常組。胰島素組間質(zhì)細(xì)胞、間質(zhì)微血管超微結(jié)構(gòu)與正常組接近。
　　8.氟伐他汀對糖尿病大鼠血清

9、睪酮的影響：糖尿病組大鼠睪酮水平較正常組顯著降低（P＜0.01）。氟伐他汀18mg/kg組睪酮水平較糖尿病組顯著增高（P＜0.01），但不及胰島素組；胰島素組睪酮水平低于正常組（P＜0.05）。
　　9.氟伐他汀對糖尿病大鼠睪丸組織SOD、GSH-PX活性和MDA含量的影響：與正常組大鼠相比，糖尿病模型組大鼠SOD水平顯著降低（P＜0.01）、GSH-PX、MDA水平顯著增高（P＜0.01）；與糖尿病組大鼠相比，氟伐他汀各組SOD

10、水平顯著增高（P＜0.01或P＜0.05），GSH-PX水平、MDA水平顯著下降（P＜0.05或P＜0.01）；氟伐他汀各組SOD、GSH-PX、MDA水平與胰島素組間無顯著性差異（P＞0.05）。
　　10.氟伐他汀對糖尿病大鼠睪丸生精細(xì)胞Bax，Bcl-2免疫組化陽性細(xì)胞表達(dá)的影響：在正常組中，Bcl-2表達(dá)最明顯，Bax表達(dá)最少，而糖尿病組較其余各組Bcl-2表達(dá)顯著減少（P＜0.01），Bax表達(dá)顯著增加（P＜0.01）；

11、氟伐他汀治療組較糖尿病組Bcl-2表達(dá)顯著增加，Bax表達(dá)顯著減少（P＜0.01），且18mg/kg組優(yōu)于6mg/kg組。胰島素組較氟伐他汀組Bcl-2表達(dá)增加、Bax表達(dá)減少（P＜0.01），但與正常組比較還存在顯著性差異（P＜0.01）。
　　結(jié)論:
　　1.氟伐他汀可減輕糖尿病大鼠的睪丸損傷，對睪丸組織具有保護(hù)作用。
　　2.氟伐他汀對糖尿病大鼠睪丸損傷的保護(hù)作用機(jī)制可能與減輕糖尿病大鼠睪丸組織氧化應(yīng)激水平以及調(diào)