順鉑腎毒性生化與分子機理研究.pdf

1、由于順鉑在耗竭細胞-SH的同時還可抑制抗氧化物酶活性,破壞了氧自由基代謝的平衡狀態(tài),引發(fā)氧化反應激,使腎小管細胞產(chǎn)生氧化性損傷.該研究還將氧化性損傷在順鉑腎毒性中的作用進行研究.第一部分;氧化性損傷在順鉑腎毒性中的作用.目的;采用體外培養(yǎng)的豬腎小管細胞系LLC-PK1,考察順鉑引起的細胞內(nèi)氧自由基的改變,并應用抗氧化物消除自由基的產(chǎn)生,結合順鉑的細胞毒性,研究氧化性損傷在順鉑腎素性中的作用.結論:1、順鉑可以使細胞內(nèi)氧自由基產(chǎn)生增高,提

2、示順鉑可引起氧化性損傷,.但自由基增高發(fā)生在3小時之內(nèi),工未隨順鉑作用時間的延長而持續(xù)增高.2、NAC、DFO和DMSO都有效地預防順鉑引起的氧自由基的增高,但只有NAC能夠預防順鉑細胞毒性.3、NAC能與順鐵結合而滅活順鉑,從而具有理想的預防作用.DFO與DMSO雖然能清除自由基,卻不能預防順鉑細胞毒性,提示氧化性損傷不是順鉑所致毒性的主要原因.第二部分順鉑對蛋白酶體抑制作用的研究.目的:研究順鉑對蛋白酶體的抑制作用及其與凋亡的關系.

3、結論:1、順鉑對蛋白酶體有一定的抑制作用,但它不是蛋白酶體的特異的抑制劑,抑制作較強.2、p53的表達變化并不能完全用蛋白酶體抑制解釋,順鉑可能同時影響了p53表達的其它環(huán)節(jié),但順鉑作用細胞早期p53的表達增高可能與蛋白酶的體的抑制有關.3、順鉑對蛋白酶體的抑制作用可能參與了調(diào)亡的發(fā)生.第三部分ERCC1表達載體的構建及其在腎細胞中的表達.目的:構建ERCC1表達載體并在腎細胞中表達;初步觀察順鉑對ERCC1過表達腎細胞的毒性變化.結論