番茄microRNA定量檢測及其與病毒侵染的關系.pdf

1、浙江理工大學碩士學位論文番茄micrNA定量檢測及其與病毒侵染的關系姓名：王鍇申請學位級別：碩士專業(yè)：生物化學與分子生物學指導教師：陳集雙20081201浙江理T大學碩學位論文RTPCR方法對miRNA的檢測分析。建立了在植物中研究roARNA與其靶基因表達與植物感病表型相互關系的試驗體系，為以后的研究提供參考。黃瓜花葉病毒(Cucumbermosaicvirus，CMv)是一種較為常見的植物病毒，番茄不孕病毒(Tomatoasperm

2、yvirusTAV)和CMV同屬于雀麥花葉病毒科(Bromorididae)科，它們從病毒粒子外形到基因組結果諸多方面都很相似。它們都編碼沉默抑制子2b蛋白對抗植物的sigNA調節(jié)途徑。但是它們在侵染的寄主上表現的癥狀有明顯差異，CMVFnyA2b為缺失2b基因的CMVFny株系，已不具有表達沉默抑制子2b的能力。不同病毒沉默抑制子通常會特異的對沉默路徑中的不同組分產生作用。寄主被這3種病毒侵染后，將會是小RNA調控途徑出現不同的變化。

3、通過對rniRNA及其靶基因的檢測將使有助于了解病毒侵染使寄主的生理特征發(fā)生怎樣的變化，揭示癥狀產生的根本原因，搞清致病機理。經過試驗發(fā)現在侵染病毒1015天的階段，植物體的miRNA出現了整個檢測周期最劇烈的變化。而這個階段也是病毒積累量最大，植物癥狀最明顯的階段。在CMVFny株系，TAVBJ作用下寄主葉組織中絕大部分靶基因的表達量都出現一定程度的升高，其中前者強于后者，表明可能兩者沉默抑制子的作用不同，而CMVFnyA2b靶基因變