miR-200家族在魚類精巢和胚胎發(fā)育中的表達和功能研究.pdf

1、MicroRNAs(miRNAs)在脊椎動物的性別分化和性腺發(fā)育過程中發(fā)揮重要調(diào)控作用。黃顙魚作為我國性別異形經(jīng)濟魚類的代表，其雌、雄性腺的miRNAs表達譜均未見報道，此外黃顙魚性腺發(fā)育的分子機制仍不清楚。本研究首先通過Solexa深度測序技術(shù)檢測了3種類型的黃顙魚性腺（XX型雌魚卵巢，XY型雄魚精巢以及YY超雄魚精巢）。測序數(shù)據(jù)產(chǎn)生了384個保守的miRNA s和113個潛在的新miRNAs，其中分別有23，30和14個miRNAs

2、在XX卵巢，XY精巢以及YY精巢中特異表達。研究發(fā)現(xiàn)黃顙魚性腺中一些性別差異表達的miRNAs，在其他脊椎動物中也呈現(xiàn)出相似的性別相關(guān)的表達模式。我們還觀察到miR-200家族成員(包括miR-141和miR-429)在XY精巢的表達水平均比YY精巢的低。組織學分析顯示YY超雄魚的精巢比XY雄魚的精巢成熟度要高，因為YY超雄魚的精巢有更大的精小囊，且精小囊中有更多的精細胞和更少的精母細胞。此外，當用高濃度的雌激素處理XY型雄性黃顙魚，損

3、害其精巢發(fā)育和細胞增殖時，5個miR-200家族成員在精巢中的表達水平均顯著上調(diào)。黃顙魚miR-141和miR-429的表達水平隨著精巢發(fā)育的進程而表達下調(diào)，該現(xiàn)象與人類中的報道一致。最后，通過熒光定量PCR檢測了隨機挑選的9個miRNAs，它們在黃顙魚性腺的表達模式與高通量測序結(jié)果一致。我們的研究結(jié)果為不同性別類型黃顙魚性腺miRNAs轉(zhuǎn)錄組分析提供了較為全面的信息，并初步證實了miR-200家族參與調(diào)控精巢發(fā)育和精子生成。
　

4、　脊椎動物中g(shù)rowth hormone/insulin-like growth factor(GH/IGF)軸在軀體生長方面發(fā)揮了重要的調(diào)控作用。GH/IGF軸基因的表達水平與一些哺乳動物以及水產(chǎn)養(yǎng)殖魚類的生長速度的快慢呈正相關(guān)。然而GH/IGF軸基因在發(fā)育早期的直接調(diào)控機制仍不清楚。miR-200家族在脊椎動物中非常保守，它在果蠅中的唯一同源成員是miR-8。MiR-8/200s在軀體生長方面的功能最先在果蠅中發(fā)現(xiàn)，被認為是促進生長

5、的因子。但miR-200家族在脊椎動物中是否具有調(diào)控生長的作用未見報道。對斑馬魚的研究揭示了保守的miR-200家族成員能夠調(diào)控胚胎大小，他們主要通過靶向一些GH/IGF軸基因(GH，GHRa，GHRb和IGF2a)來發(fā)揮作用。過表達miR-200s成員導致細胞停滯在G1期，并且在胚胎時期誘導凋亡反應(yīng)，因而抑制斑馬魚胚胎的軀體生長。值得注意的是，GH能誘導p53和miR-200s的表達，miR-200s又是p53的潛在轉(zhuǎn)錄靶基因，而在p