GM-CSF凝膠對深Ⅱ度燒傷創(chuàng)面溶痂的影響及其機理分析.pdf

1、研究背景和目的：
　　深Ⅱ度燒傷創(chuàng)面壞死組織是影響創(chuàng)面愈合的重要因素，由于其壞死組織的持續(xù)存在，會加重創(chuàng)面局部炎癥反應，導致感染和局部組織進行性損害。及早清除壞死組織是促進深Ⅱ度燒傷創(chuàng)面愈合的重要治療手段之一。目前最常用及有效的去除深Ⅱ度燒傷創(chuàng)面壞死組織的方法為中藥脫痂和手術削痂（tangential excision）。
　　粒細胞巨噬細胞集落刺激因子（granulocyte-macrophage colony- stim

2、ulating factor，GM-CSF）可由多種創(chuàng)面組織細胞合成和分泌，趨化和激活炎癥細胞（中性粒細胞和巨噬細胞），從而調控創(chuàng)面愈合的進程。既往研究表明，深Ⅱ度燒傷創(chuàng)面的溶痂主要是創(chuàng)面炎癥細胞所分泌的蛋白水解酶和基質金屬蛋白酶的作用，故我們設想GM-CSF具有通過趨化、激活炎癥細胞促進深Ⅱ度燒傷創(chuàng)面脫痂并加快創(chuàng)面愈合的作用。
　　本研究通過動物實驗和臨床觀察，驗證重組人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子（recombinant hum

3、an granulocyte-macrophage colony-stimulating factor， rhGM-CSF）對深Ⅱ度燒傷創(chuàng)面壞死組織溶痂和促進創(chuàng)面愈合的作用效果，并分析其可能的機理。
　　研究方法：
　　1．動物實驗
　　SD大鼠70只用熱液燒傷的方法（75℃、8s）制成背部深Ⅱ度燒傷創(chuàng)面，燒傷大鼠隨機分為實驗組和對照組（每組35只）。對照組（C組）：創(chuàng)面局部外用不含 rhGM-CSF的凝膠基質，實驗組

4、（E組）：創(chuàng)面局部外用 rhGM-CSF凝膠（100μg/10g）。燒傷后每天外用藥物至傷后21d。分別于制創(chuàng)后1、3、5、7、10、14和21d觀察兩組動物創(chuàng)面情況并攝像，記錄創(chuàng)面平均溶痂時間；用圖像分析軟件計算不同時相點的溶痂率；并于不同的時相點取創(chuàng)面組織，HE染色觀察創(chuàng)面組織形態(tài)及修復情況；免疫組化染色觀察創(chuàng)面中性粒細胞和巨噬細胞浸潤情況。ELISA法測定創(chuàng)面彈力蛋白酶（NE）和基質金屬蛋白酶（MMP-1、MMP-9）的蛋白表達。

5、并作統(tǒng)計學分析。
　　2．臨床觀察
　　收集我院自2008年12月份至2010年12月份燒傷部位對稱或臨近、燒傷深度為深Ⅱ度的小面積燒傷患者共58例，隨機分為實驗組和對照組。實驗組創(chuàng)面使用100ug/10g/支 rhGM-CSF凝膠劑，對照組使用不含rhGM-CSF的凝膠基質，隔天換藥。觀察并計算深Ⅱ度燒傷創(chuàng)面自換藥后完全溶痂時間，第2、6、10、14、18天創(chuàng)面溶痂率，燒傷后創(chuàng)面愈合時間。
　　研究結果：
　　

6、1．動物實驗：
　　1．1、從燒傷后第5d起各時相點，實驗組大鼠創(chuàng)面溶痂率與對照組表現(xiàn)出差異；實驗組創(chuàng)面平均溶痂時間為10.73±2.47d較對照組14.26±2.65d顯著縮短（P<0.01）；實驗組和對照組創(chuàng)面愈合時間分別為16.21±1.27d和18.05±1.36d，差異顯著（P<0.01）；
　　1．2、創(chuàng)面病理檢查提示傷后3-7d,實驗組創(chuàng)面局部炎癥細胞浸潤較對照組增多，實驗組創(chuàng)面局部壞死組織脫落也較對照組提前；

7、
　　1．3、兩組動物創(chuàng)面均于傷后3d起NE顯著增高，傷后7d達到峰值。之后逐漸下降，至傷后14d基本接近傷前水平。實驗組于傷后3-7d,NE水平明顯高于對照組（P<0.01）。而兩組創(chuàng)面MMP-1和MMP-9的蛋白水平則于傷后3d到達峰值，繼之逐漸下降，至傷后14d均接近傷前水平；其中實驗組在傷后3-5d，MMP-1和MMP-9的水平均顯著高于對照組水平（P<0.01）；
　　2．臨床觀察
　　試驗組完全溶痂時間為7

8、.71±2.76d，較對照組14.13±3.34d明顯縮短（P<0.01）；實驗組第2、6、10天創(chuàng)面溶痂率（％）分別為34.30±10.40、82.20±17.50、98.36±4.46，較對照組11.03±4.47、40.69±11.56、68.88±9.76明顯提高（P<0.01）；實驗組深II度燒傷創(chuàng)面平均愈合時間18.41±2.47d較對照組平均愈合時間23.58±3.35d明顯縮短（P<0.01）；
　　研究結論：