低位直腸癌患者中腹腔灌洗液及區(qū)域淋巴結(jié)中CK20的臨床研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文低位直腸癌患者中腹腔灌洗液及區(qū)域淋巴結(jié)中CK20的臨床研究姓名：王寧申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：于躍明20040301中文摘要方法：隨機(jī)選取2002年6月至2002年11月在河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院行外科根治性手術(shù)治療的35例低位直腸癌(腹膜返折以下)患者的區(qū)域淋巴結(jié)和腹腔灌洗液標(biāo)本。區(qū)域淋巴結(jié)標(biāo)本均于離體半小時(shí)內(nèi)采集，液氮速凍，后放置于80“C冰箱儲(chǔ)存?zhèn)溆?；所有?biāo)本均經(jīng)術(shù)后病理證實(shí)。腹腔灌洗液于手術(shù)開始

2、后馬上留取200ml，其中l(wèi)OOml做腹腔灌洗液細(xì)胞學(xué)(peritoneallavagecytologyPLC)檢查，另外100ml經(jīng)離心后馬上用Trizol法提取總RNA，經(jīng)凝膠電泳檢測(cè)無降解后進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，轉(zhuǎn)錄出的cDNA以13actin作為內(nèi)參照標(biāo)準(zhǔn)，通過針對(duì)CK20的特異性引物進(jìn)行擴(kuò)增，對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物通過凝膠成像系統(tǒng)進(jìn)行掃描分析，從而判斷是否存在腫瘤細(xì)胞。根據(jù)基因CK20的陽性率的檢出情況，運(yùn)用x2檢驗(yàn)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果：13

3、5例低位直腸癌患者的腹腔灌洗液中，以常規(guī)細(xì)胞學(xué)方法檢測(cè)，有6例陽性，占171％，其中A期0例，B期1例(167％)，C期4例(667％)，D期1例(167％)，陽性率逐漸增加。以RTPCR方法檢測(cè)，腹腔灌洗液中CK20mRNA陽性25例，占71螄，，其中A期1例(4％)，B期3例(12％)，C期16例(64％)，D期5例(20％)，DukesA，B，C期陽性率逐漸增加。RTPCR法檢測(cè)陽性率明顯優(yōu)于細(xì)胞學(xué)檢測(cè)，x2=20902，p005