大蒜多倍體化學誘導技術研究.pdf

1、本文研究了建立大蒜(Allium staivum L．)化學誘導多倍體產(chǎn)生的兩條途徑，采用添加化學誘導劑于培養(yǎng)基上的離體愈傷誘導方法和蒜瓣莖尖注射化學誘導劑的活體注射方法，并篩選出合適的誘導途徑、化學誘導劑和誘導劑濃度。 (1)以G064品種的莖盤為外植體，在MS+2，4-D2.0+6-BA1.0上獲得愈傷組織，在MS+NAA2.0+BA1.0培養(yǎng)基繼代培養(yǎng)，通過愈傷組織在分化培養(yǎng)基上分化出不定芽。愈傷組織在繼代培養(yǎng)過程中易發(fā)生

2、變異，隨著繼代次數(shù)的增加分化能力下降，繼代1～2次的愈傷組織分化能力最強。MS+6-BA3.0+IAA0.1是愈傷組織分化不定芽的最適培養(yǎng)基，平均每塊愈傷組織分化3.6個不定芽。 (2)將愈傷組織置于分別添加3個不同濃度的秋水仙素、二甲戊靈、氟樂靈溶液的固體培養(yǎng)基上，誘導多倍體發(fā)生。變異的誘導主要受誘導劑濃度和處理時問的影響。0.1％秋水仙素處理5d時，愈傷組織的存活率達到80.7％，分化率78.1％，四倍體的誘導率為4％。10

3、0μmol/L二甲戊靈處理5d愈傷組織的存活率達100％，是秋水仙素十分理想的替代品，四倍體的誘導率為3.1％。而氟樂靈具有強揮發(fā)性，對愈傷組織的傷害比較大，愈傷組織在高濃度短時間內存活率較高，但分化率只有53.7％，100μmol/L處理5d時僅獲得四倍體苗1棵。 (3)采用不同濃度的秋水仙素、二甲戊靈、氟樂靈溶液分別注射處理G064、G025、G091蒜瓣生長點，使大蒜葉片的下表皮氣孔長度、寬度、面積和周長極顯著增大，且氣孔

4、密度減小；通過對根尖染色體的觀察，根尖染色體數(shù)目加倍，顯示大蒜蒜瓣莖尖染色體被有效加倍。濃度為0.1％的秋水仙素溶液對G064和G091葉下表皮氣孔的誘導效果最佳，處理G025大蒜莖尖最佳秋水仙素濃度則為0.05％；二甲戊靈100μmol/L對三種基因型大蒜莖尖的處理效果都比較理想;氟樂靈對三種基因型大蒜作用各有不同，短時間200μmol/L的處理濃度對G064有利，而G025在50μmol/L的誘導下葉片下表皮氣孔大小與對照差異顯著，

5、G091由于其本身的受創(chuàng)易腐爛的特性，氟樂靈處理后氣孔變異較小，但高濃度短時間和低濃度長時間處理效果比較好。 分別觀察大蒜3片葉的下表皮氣孔發(fā)現(xiàn)，隨著葉片的不斷生長，誘導劑的處理效果呈下降趨勢，對第一片葉的誘導效果最佳。蒜瓣莖尖注射誘導劑3d，在第三片葉發(fā)出前剝取莖尖接種誘導加倍植株，獲得多倍體大蒜。 (4)莖尖作為大蒜生長點，是分化能力最強的理想外植體。以蔗糖為糖源的MS+GA100+6-BA3.0+NAA0.1是誘導