腦紅蛋白在脊髓缺血再灌注損傷中的表達及其意義.pdf

1、目的：脊髓缺血再灌注損傷(spinal cord ischemia/reperfusioninjury，SCI)在臨床上十分常見。目前關于SCI的損傷修復機制尚不十分明確，在臨床治療方面主要是針對其損傷機制進行的，而對其內(nèi)源性保護機制的相關研究卻明顯不足。因此，加強SCI內(nèi)源性保護機制研究，以便治療過程中調(diào)動其內(nèi)源性保護機制，為SCI治療提供新的思路。研究發(fā)現(xiàn)[1]，腦紅蛋白(neuroglobin，NGB)對神經(jīng)細胞具有保護作用，可以

2、清除細胞內(nèi)的多余的反應性氧化物(reactive oxidativespecies，ROS)，減弱脂質(zhì)過氧化作用。另外，NGB可減輕細胞損害引起的線粒體異常和細胞調(diào)亡，提高細胞的存活。目前關于NGB在SCI中的表達及其意義尚未見確切報道。為此，本研究在制作SCI模型的基礎上，對NGB的表達變化規(guī)律進行了探討，以期為脊髓損傷修復機制的研究和臨床干預性治療提供試驗依據(jù)。 方法： ①健康成年Wistar大鼠56只，雌雄不拘，體

3、質(zhì)量250～300 g，由重慶醫(yī)科大學實驗動物中心提供。隨機將動物分為兩組：脊髓壓迫缺血再灌注組50只，每個時間點10只；假手術組共6只，每個時間點1只。②采用大鼠脊髓壓迫器(專利號稱ZL200520009289)制備脊髓壓迫缺血再灌注模型；假手術對照組，只作全椎板切除不做脊髓壓迫。 ③運用原位雜交組織化學技術、Western-blotting等方法，分別于缺血再灌注后2、12、24、48和72h，檢測壓迫段脊髓組織中NGBmR

4、NA和NGB的表達變化情況。 ④利用北京航空航天大學生物醫(yī)學圖像分析系統(tǒng)(CM-2000B)和SAS統(tǒng)計分析軟件對所得圖像和數(shù)據(jù)進行分析。 結(jié)果： ①再灌注2h后，NGBmRNA陽性神經(jīng)元數(shù)量在壓迫段脊髓開始表達上調(diào)，在24h和48h較為明顯,48h達峰值， 72h表達減少，在2、12、24、48和72h不同時相，其陽性神經(jīng)元數(shù)分別為(114±14)、(147±16)、(163±16)、(182±17)和(150

5、±18)，與假手術組相比較，具有顯著性差異(P＜0.05)。 ②再灌注2h后，NGBmRNA陽性神經(jīng)元平均光密度值(OD)在壓迫段脊髓開始升高，在24h和48h較為明顯,48h達峰值， 72h表達減少，在2、12、24、48和72h不同時相，其平均光密度值分別為(0.26±0.05)、(0.28±0.04)、(0.30±0.05)、(0.41±0.08)和(0.32±0.06)，與假手術組相比較，具有顯著性差異(P＜0.05)。

6、 ③Western-blotting的結(jié)果提示NGB表達和上述結(jié)果一致.在2、12、24、48和72h不同時相，其積分光密度值分別為(305.13±23.01)、(413.59±34.91)、(791.32±40.72)、(1134.22±41.18)和(516.32±26.45)，與假手術組相比較，具有顯著性差異(P＜0.05)。 結(jié)論：在脊髓缺血再灌注損傷中，NGB的表達變化與再灌注時間相關，其表達的上調(diào)是機體內(nèi)源性