GM-CSF對(duì)糖尿病小鼠創(chuàng)面愈合的影響及其機(jī)理研究.pdf

1、研究目的: 應(yīng)用糖尿病小鼠創(chuàng)面模型，了解糖尿病狀態(tài)下創(chuàng)面愈合的規(guī)律。研究外源性GM-CSF的局部應(yīng)用對(duì)糖尿病小鼠創(chuàng)面愈合的影響，并就其作用機(jī)制作初步探討。 研究方法: C57BL/6小鼠72只分為糖尿病組（DM組）和正常對(duì)照組（NM組），DM組小鼠用鏈脲佐菌素（STZ）誘導(dǎo)建立DM模型。所有小鼠背部脊柱中線兩側(cè)對(duì)稱部位切除0.8cm×0.8cm大小全厚層皮膚創(chuàng)面。創(chuàng)面按左側(cè)GM-CSF、右側(cè)空白凝膠對(duì)照用藥，分別

2、于制創(chuàng)后1、3、5、7、10、14 d觀察創(chuàng)面愈合情況，測(cè)算創(chuàng)面愈合率；并創(chuàng)區(qū)取材，用病理學(xué)技術(shù)（HE染色、Masson特殊染色、免疫組化技術(shù)）觀察創(chuàng)面再上皮化、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、膠原纖維沉積及新生血管率；用堿性水解法檢測(cè)創(chuàng)面羥脯氨酸濃度，間接反應(yīng)創(chuàng)面膠原含量；用ELISA技術(shù)檢測(cè)創(chuàng)面重要炎癥因子（IL-6、TGF-β1）的含量變化，作統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 研究結(jié)果: 1 STZ誘導(dǎo)的DM小鼠模型，具有典型的“三高一低”的臨床癥狀，

3、檢測(cè)指標(biāo)均符合DM動(dòng)物模型的標(biāo)準(zhǔn)。 2 DM組小鼠創(chuàng)面使用GM-CSF后愈合率明顯提高；NM組雙側(cè)對(duì)比無(wú)明顯差異；各時(shí)相點(diǎn)，NM組創(chuàng)面愈合率均明顯高于DM組。 3 DM組和NM組小鼠使用GM-CSF后，創(chuàng)面局部中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)均有明顯增加，新生血管再生明顯。 4 DM組小鼠使用GM-CSF后，創(chuàng)面局部各時(shí)相點(diǎn)羥脯氨酸含量和膠原纖維的沉積明顯提高；NM組小鼠創(chuàng)面雙側(cè)對(duì)比無(wú)明顯差異。 5 DM組和N

4、M組小鼠使用GM-CSF后，創(chuàng)面局部細(xì)胞因子IL-6和TGF-β1濃度明顯高于對(duì)側(cè)。 結(jié)論及意義: 外源性GM-CSF的應(yīng)用可促進(jìn)DM小鼠創(chuàng)面中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)和新生血管的再生，可增加創(chuàng)面膠原蛋白的含量，提高IL-6和TGF-β1的表達(dá)，促進(jìn)DM小鼠創(chuàng)面的愈合。 外源性GM-CSF的應(yīng)用也有促進(jìn)NM小鼠創(chuàng)面中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)和新生血管再生的作用，并可提高IL-6和TGF-β1的表達(dá)，但對(duì)創(chuàng)面局部膠