一個非綜合征型視網膜色素變性家系致病基因的鑒定.pdf

1、視網膜色素變性(Retinitis Pigmentosa，RP)是一類最常見的遺傳性視網膜營養(yǎng)不良癥，由視網膜感光細胞（包括視桿細胞和視錐細胞）或色素上皮細胞進行性退化而導致視力進行性損失，中國人群的發(fā)病率可達1/1000。其發(fā)病機制很復雜，涉及多種不同的生物代謝途徑。RP臨床上主要分為綜合征型及非綜合征型兩類，其中非綜合征型視網膜色素變性(Nonsyndromic retinitis pigmentosa，NSRP)占65％，其散發(fā)比

2、例高達42％。RP遺傳方式異常復雜，除了具有典型的孟德爾遺傳方式外，還存在一些罕見的非典型遺傳模式。此外，RP具有高度的臨床異質性與遺傳異質性，目前至少存在65個致病基因，但仍有約40％的RP患者致病原因未知。
　　目的:
　　對我室至今遺傳診斷未明確的一個NSRP家系進行遺傳學分析，以明確其致病原因及發(fā)病機制，并對家系的患者及其他成員提供遺傳咨詢及生育指導，防止出生缺陷。
　　方法:
　　1、在我室前期遺傳學分

3、析的基礎上，對該家系的1名患者進行進一步的目標基因篩查，選取近年來新發(fā)現(xiàn)的2個常染色體顯性RP致病基因:SNRNP200及KL HL7基因，對這2個基因的外顯子及其側翼序列進行PCR加Sanger測序分析;
　　2、對該家系的1名患者進行多重連接探針擴增技術(MLPA)分析，以明確RHO、RP1、IMPDH1、PRPF31、RP2及RPGR這些RP已知致病基因外顯子的大片段缺失或重復突變;
　　3、對該家系的2名患者進行外顯

4、子組測序，并結合生物信息學分析以明確該RP家系潛在的致病原因。
　　結果:
　　1、Sanger測序分析發(fā)現(xiàn)該家系患者SNRNP200及KLHL7基因編碼區(qū)不存在微小致病突變;
　　2、MLPA分析發(fā)現(xiàn)該家系患者不存在上述RP已知致病基因外顯子的大片段缺失或重復突變;
　　3、聯(lián)合外顯子組測序及生物信息學分析發(fā)現(xiàn)APOE基因存在c.784G＞A(p.Glu262Lys)及c.787G＞A(p.Glu263Lys)

5、2個雜合突變，且這2個突變位于同一條染色體上，為APOE基因罕見突變體ApoE7-Suita。該突變體在該家系中與疾病表型共分離，且在200個正常對照中未被發(fā)現(xiàn)。此外，還發(fā)現(xiàn)該家系所有患者均存在PDE6B基因c.2030C＞A雜合突變，但該突變在家系內與疾病表型不共分離。
　　結論:
　　1、本研究通過Sanger測序排除了該家系存在SNRNP200及KLHL7基因編碼區(qū)的微小致病突變，以及通過MLPA分析排除了存在RHO、