手足口病EV71病毒串聯(lián)表位的免疫性研究.pdf

1、腸道病毒71型(Enterovirus71，EV71)是小核糖核酸病毒科腸道病毒屬，單鏈的小RNA腸道病毒，其感染性強且致病率高，對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的侵害尤其嚴(yán)重。近年來，EV71引起社會各界的關(guān)注是因為發(fā)現(xiàn)該病毒是兒童手足口病(HFMD)的主要病原體之一，特別是導(dǎo)致6歲以下兒童重癥手足口病(HFMD)的發(fā)生。據(jù)統(tǒng)計，目前手足口病90％以上的重癥病例是由EV71引起，患兒除了有HFMD的典型癥狀外，還有高達(dá)11.1％和0.6％的感染者患有無

2、菌性腦膜炎、腦炎的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，且病程進(jìn)展迅速，導(dǎo)致近年來死亡率都高于25/1000。EV71的爆發(fā)流行嚴(yán)重危害我國兒童的身體健康，給廣大民眾帶來極大的心理恐慌?，F(xiàn)階段國內(nèi)外尚未研制出針對EV71的疫苗、特異性治療藥物，對于控制HFMD的發(fā)生主要依靠對低幼齡兒童進(jìn)行宣傳教育，建立良好的衛(wèi)生習(xí)慣，因此研究安全，高效，經(jīng)濟的疫苗迫在眉睫。
　　本研究以EV71表位肽疫苗研究為著手點，通過比較29個國內(nèi)流行株(來自福建，安徽阜陽，江

3、蘇，浙江等省份)C4型基因序列，以及28個NCBI基因庫中收錄的B型EV71異型毒株的基因序列，發(fā)現(xiàn)5個表位在不同血清型的病毒株中能保持很高的同源性。以日本腦炎的D蛋白為載體蛋白與上述5個表位以T-T-B和T-B-B的方式串聯(lián)，一共設(shè)計構(gòu)建了8種表位肽組合，并在原核表達(dá)系統(tǒng)中進(jìn)行了高效表達(dá)。
　　以原核表達(dá)的重組蛋白為抗原進(jìn)行的免疫性試驗，結(jié)果顯示，上述8種組合均能在小鼠血清中的產(chǎn)生抗體；其中C，E，F(xiàn)，H四種組合能產(chǎn)生較高水平的