丙丁酚對高脂血癥小鼠對氧磷酶1及氧化應(yīng)激的影響.pdf

1、目的:
　　觀察丙丁酚對高脂高膽固醇飼養(yǎng)的C57BL/6J小鼠和apoE基因缺陷(apoE-/-)小鼠血脂水平及動脈粥樣硬化病變的影響;并觀察丙丁酚對高脂血癥小鼠機體PON1及氧化狀態(tài)的影響,探討丙丁酚影響高脂血癥小鼠動脈粥樣硬化病變的可能作用機制。
　　方法:
　　隨機將C57BL/6J小鼠和apoE-/-小鼠各30只分別分為基礎(chǔ)飼料組(ND)、高脂高膽固醇飼料組(HFHC)和高脂高膽固醇+丙丁酚組(HFHC+P)。

2、基礎(chǔ)飼料組僅飼以小鼠標準飼料,高脂高膽固醇組飼以添加15％豬油和0.25%膽固醇的飼料,高脂高膽固醇+丙丁酚組飼以添加15%豬油、0.25%膽固醇和0.5%丙丁酚的飼料。動物喂養(yǎng)12周,摘眼球取血。小鼠處死后取材,采用蘇丹IV染色檢測主動脈內(nèi)膜面動脈粥樣硬化病變面積;HE染色小鼠肝臟,光鏡下觀察肝臟內(nèi)脂肪空泡。采用酶比色法及直接檢測試劑盒分別測定小鼠血清甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽

3、固醇(LDL-C)的含量。采用相應(yīng)的試劑盒分別檢測各組小鼠血清總抗氧化能力(T-AOC)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)、氧化LDL(ox-LDL)、C反應(yīng)蛋白(CRP)和谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)的水平。采用改良的Eckerson的測定方法,通過比色定量檢測血清對氧磷酶1(PON1)的活性。采用RT-PCR檢測小鼠肝臟PON1和CRP基因的表達。
　　結(jié)果:
　　動物飼養(yǎng)12周后處死。血脂測定結(jié)果顯示,

4、高脂高膽固醇飲食顯著增加C57BL/6J和apoE-/-小鼠血脂水平。而與兩種小鼠各自的HFHC組比較,丙丁酚可以顯著降低高脂高膽固醇飼喂的C57BL/6J小鼠血清中TG、TC、HDL-C和LDL-C水平(P<0.05),而對apoE-/-小鼠的血清TG、TC和LDL-C水平也可降低(P<0.05),但效果不如對C57小鼠的作用顯著。蘇丹IV染色顯示C57BL/6J小鼠主動脈內(nèi)膜面的動脈粥樣硬化病變不如apoE-/-小鼠明顯,經(jīng)丙丁酚處

5、理后,C57BL/6J小鼠和apoE-/-小鼠主動脈內(nèi)膜面動脈粥樣硬化病變的面積均減少。肝臟組織 HE染色顯示,高脂高膽固醇飲食可以明顯增加小鼠肝臟的脂質(zhì)蓄積,與HFHC組比較,兩種小鼠經(jīng)丙丁酚處理后其肝臟脂肪空泡減少。檢測氧化-抗氧化平衡相關(guān)的指標發(fā)現(xiàn),高脂血癥小鼠MDA及ox-LDL的水平增高(P<0.05),而T-AOC和SOD水平降低(P<0.05)。經(jīng)丙丁酚處理后,高脂血癥小鼠的T-AOC和SOD水平上升,MDA及ox-LDL

6、的水平則降低(P<0.05)。與基礎(chǔ)飼料組相比,血清中PON1的活性及肝臟PON1 mRNA的表達也在HFHC組降低,而HFHC+丙丁酚處理組較HFHC組升高(P<0.05)。檢測血清中CRP和GST的活性以及分析肝臟CRP mRNA表達水平結(jié)果顯示,HFHC組較普食組高,而HFHC+丙丁酚組較HFHC組低(P<0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.丙丁酚可以降低高脂高膽固醇飼料飼養(yǎng)小鼠的血清膽固醇和三酰甘油水平,減輕動脈粥樣硬