國(guó)產(chǎn)乙烯乙烯醇聚合物（EVAL）的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：合成國(guó)產(chǎn)乙烯一乙烯醇聚合物(EVAL)進(jìn)行性能測(cè)試、生物學(xué)檢測(cè)和體外栓塞實(shí)驗(yàn)，探討其作為一種新型栓塞材料的可行性。應(yīng)用EVAL聚合物栓塞豬顱底微血管網(wǎng)(RMB)，探討其栓塞腦動(dòng)靜脈畸形(AVM)的技術(shù)可行性、可控性和組織病理學(xué)變化。 材料和方法: 1．實(shí)驗(yàn)室研究 在4～5 MPa的壓力下，以叔丁醇作溶劑，乙烯和醋酸乙烯發(fā)生自由基共聚反應(yīng)，生成乙烯-醋酸乙烯共聚物(EVA)。然后以甲醇為溶劑，強(qiáng)堿為催化劑，醇

2、解得到聚合物EVAL。反應(yīng)完畢后，將聚合物EVAL溶解于二甲亞砜(DMSO)中，加入一定量的鉭粉，120℃高溫滅菌30min，進(jìn)行輸送模擬試驗(yàn)。應(yīng)用體外腦動(dòng)靜脈畸形模型進(jìn)行體外模擬栓塞試驗(yàn)，樣品送國(guó)家食品藥品管理局濟(jì)南醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心進(jìn)行全性能檢測(cè)。 2．動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 健康家豬6頭，體重25～30Kg，性別不限。分三組：急性期實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(栓塞后1天、1周)2頭，亞急性期(栓塞后4周)1頭，慢性期(栓塞后8周、12周、2

3、4周)3頭。術(shù)前肌注阿托品1mg，應(yīng)用鹽酸氯胺酮結(jié)合米唑安定進(jìn)行動(dòng)物全麻。經(jīng)股動(dòng)脈途徑，應(yīng)用5F造影導(dǎo)管行頸總動(dòng)脈插管。后更換導(dǎo)引導(dǎo)管并經(jīng)此將Ultra Flow HPC微導(dǎo)管超選擇插入咽升動(dòng)脈，微導(dǎo)管頭端放置在咽升動(dòng)脈咽支的遠(yuǎn)端，行微導(dǎo)管造影。經(jīng)微導(dǎo)管用1ml注射器注入國(guó)產(chǎn)EVAL，注入EVAL前用二甲亞砜(DMSO)沖洗微導(dǎo)管，以防共聚物在微導(dǎo)管內(nèi)凝聚，然后再注射栓塞劑。按預(yù)定分組時(shí)間復(fù)查造影，觀察有無(wú)血管再通現(xiàn)象。后處死動(dòng)物，開(kāi)顱

4、完整取出雙側(cè)RMB和腦進(jìn)行組織學(xué)檢查，觀察RMB血管內(nèi)及其周圍的變化。 結(jié)果: 1．實(shí)驗(yàn)室研究在210℃條件下，EVAL共聚物的熔融指數(shù)為4～15g/10min，可以滿足使用要求。EVAL溶解在二甲亞砜中后，二甲亞砜能迅速擴(kuò)散在水性溶液中，EVAL以沉淀的形式迅速析出，沉淀時(shí)間符合醫(yī)用要求。對(duì)EVAL聚合物的二甲亞砜溶液進(jìn)行了粘度測(cè)試及微粒含量測(cè)試，結(jié)果表明，均符合醫(yī)用要求。輸送模擬試驗(yàn)表明，選擇鉭粉作為對(duì)比劑比較合適，

5、不影響共聚物的沉淀栓塞；而使用不同的微導(dǎo)管發(fā)現(xiàn)，除了Ultra Flow HPC微導(dǎo)管外，其他微導(dǎo)管內(nèi)壁均有不同程度的腐蝕。體外模擬栓塞實(shí)驗(yàn)表明，樣品能夠成功地栓塞體外腦動(dòng)靜脈畸形模型，微導(dǎo)管腔內(nèi)無(wú)共聚物粘附。生物檢測(cè)表明，樣品無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)，內(nèi)毒素含量<20EU/支，溶血率3.2﹪，無(wú)急性全身毒性，細(xì)胞毒性反應(yīng)Ⅰ級(jí)，無(wú)皮內(nèi)刺激反應(yīng)，致敏率0﹪，植入體內(nèi)4、12和26周后，生物相容性良好，無(wú)異常組織學(xué)反應(yīng)，炎癥反應(yīng)程度符合GB/T16175

6、中的規(guī)定，無(wú)遺傳毒性反應(yīng)，重金屬含量<1.0μg/ml，pH變化值小于1.5。全性能檢測(cè)符合標(biāo)準(zhǔn)要求。 2．動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 共對(duì)6頭家豬的7個(gè)RBM(1頭豬由于栓塞過(guò)程中血管痙攣，改換另一側(cè))進(jìn)行了栓塞，EVAL的用量為1.3ml，平均為0.19ml。栓塞及隨訪過(guò)程中，所有的動(dòng)物均生存良好，沒(méi)有感覺(jué)及運(yùn)動(dòng)異常。栓塞效果較為滿意，栓塞過(guò)程沒(méi)有發(fā)生堵管現(xiàn)象，除了1頭由于反流過(guò)度造成“擠管”外，拔管均很順利。作為聚合物的顯影劑鉭粉，

7、在透視下能清晰顯示栓塞部位的血管情況。栓塞后即刻造影及隨訪造影顯示，所有動(dòng)物栓塞側(cè)的咽升動(dòng)脈/RMB均未見(jiàn)顯示，只是部分奇網(wǎng)通過(guò)發(fā)自頜內(nèi)動(dòng)脈的兩側(cè)支RA和AA顯影，并且與栓塞前血管造影相比，RA和AA有不同程度的增粗。動(dòng)物處死后解剖，肉眼觀察腦組織，5頭未見(jiàn)異常變化，有1頭后交通動(dòng)脈內(nèi)可見(jiàn)黑色栓塞物，存留于大腦腳表面，病理未見(jiàn)異常；RMB血管內(nèi)可見(jiàn)不同程度栓塞，栓塞劑在血管內(nèi)自尾側(cè)向頭側(cè)均勻彌散，所栓塞的RMB較對(duì)側(cè)質(zhì)實(shí)，RMB容易自破

8、裂孔處剝離。組織學(xué)檢查所見(jiàn)：急性期，栓塞的血管管腔內(nèi)可見(jiàn)黑色物沉著，其內(nèi)可見(jiàn)急性血栓形成，栓塞劑周圍可見(jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，主要為中性粒細(xì)胞，血管內(nèi)膜破壞，內(nèi)彈力層、肌層及外膜尚完整，管壁也可見(jiàn)中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，血管外周可見(jiàn)大量的紅細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞及中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。左側(cè)大腦腳處(大體標(biāo)本發(fā)現(xiàn)有黑色鉭粉沉著處)，光鏡下除有少量炎細(xì)胞浸潤(rùn)外，未見(jiàn)明顯異常。亞急性期，栓塞的管腔內(nèi)可見(jiàn)黑色栓塞物沉著，周圍有肉芽組織形成，栓塞劑周圍可見(jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，內(nèi)

9、膜破壞，內(nèi)彈力層、部分肌層及外膜不完整，血管周圍可見(jiàn)單核細(xì)胞、少量異物巨細(xì)胞及組織細(xì)胞浸潤(rùn)以及少量肉芽組織形成。慢性期，栓塞側(cè)血管內(nèi)及周圍仍可見(jiàn)不同程度的炎性浸潤(rùn)，包括單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、組織細(xì)胞及異物巨細(xì)胞，栓塞劑在血管內(nèi)存留良好，血管壁不同程度的變薄及破壞，血管內(nèi)及周圍可見(jiàn)不同程度的肉芽組織/纖維化。 結(jié)論: 1．國(guó)產(chǎn)EVAL生物相容性好，無(wú)全身毒性和遺傳毒性。 2．國(guó)產(chǎn)EVAL具有非粘附性，可以有效栓塞體外