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文檔簡介
1、目的:觀察丹參酮Ⅱa(TanshinoneⅡa)對人大腸癌細(xì)胞SW480細(xì)胞增殖和凋亡及血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表達的影響,探討其可能抗腫瘤的作用機制。
方法:用不同濃度的丹參酮IIa(終末濃度為0.5、1.0、2.0、5.0、10.0ug/ml)處理SW480細(xì)胞,MTT比色法檢測細(xì)胞增殖;Annexin V FITC細(xì)胞凋亡檢測試劑盒檢測SW480細(xì)
2、胞凋亡;SABC法檢測SW480細(xì)胞mTOR表達;Real-time PCR檢測SW480細(xì)胞VEGF mRNA的表達。
結(jié)果:1、MTT比色法檢測細(xì)胞增殖:丹參酮IIa抑制SW480細(xì)胞增殖效應(yīng)表現(xiàn)出劑量依賴性與時間依賴性,隨著丹參酮IIa濃度的增加,SW480細(xì)胞存活率均逐漸降低,相同濃度的丹參酮 IIa隨著作用時間延長 SW480細(xì)胞生長的抑制率亦呈增加趨勢。
2、Annexin V FITC細(xì)胞凋亡檢測:丹參
3、酮IIa作用SW480細(xì)胞24h后,SW480細(xì)胞開始出現(xiàn)凋亡現(xiàn)象,隨著丹參酮IIa藥物濃度的提高,SW480細(xì)胞表現(xiàn)為早期凋亡和晚期凋亡的比例增加。
3、SABC法檢測SW480細(xì)胞mTOR表達:SW480細(xì)胞mTOR蛋白主要為細(xì)胞漿表達,丹參酮IIa可能抑制SW480細(xì)胞的mTOR蛋白表達。
4、Real-time PCR檢測SW480細(xì)胞VEGF mRNA的表達:丹參酮ⅡA各質(zhì)量濃度組VEGF蛋白的表達均顯著降
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