依托咪酯對(duì)人外周血單個(gè)核細(xì)胞凋亡及細(xì)胞毒效應(yīng)的影響.pdf

1、背景：隨著麻醉及手術(shù)技術(shù)的發(fā)展，惡性腫瘤病人術(shù)后生存率得到了較大提高，而對(duì)于圍手術(shù)期腫瘤免疫學(xué)研究也成為新的熱點(diǎn)。自然殺傷細(xì)胞(nature kill cell，NK)是腫瘤免疫中極為重要的組成部分，它可以直接殺傷腫瘤細(xì)胞，并且已經(jīng)證明NK有消除轉(zhuǎn)移腫瘤細(xì)胞而達(dá)到抗腫瘤擴(kuò)散的能力。此外，尚且具有極強(qiáng)的免疫學(xué)調(diào)節(jié)功能。而以往對(duì)于圍手術(shù)期麻醉及麻醉藥物對(duì)腫瘤病人腫瘤免疫的影響的研究中，多數(shù)文獻(xiàn)主要著眼于術(shù)后T淋巴細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞的數(shù)量變化

2、，結(jié)果發(fā)現(xiàn)術(shù)后T細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞的數(shù)量顯著降低并存在有T細(xì)胞亞群比例失調(diào)，但很少有人進(jìn)一步探討數(shù)量降低的原因及對(duì)NK細(xì)胞功能的影響。 依托咪酯是麻醉中常用的靜脈麻醉藥之一，具有起效快，對(duì)血流動(dòng)力學(xué)影響輕微等優(yōu)點(diǎn)。臨床觀察發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)期應(yīng)用依托咪酯可以引起免疫抑制及死亡率增加，許多學(xué)者認(rèn)為這是由于依托咪酯抑制腎上腺皮質(zhì)功能所致。但由于體內(nèi)環(huán)境復(fù)雜，我們并不清楚這種作用是由依托咪酯直接抑制免疫系統(tǒng)某些成分還是由抑制腎上腺皮質(zhì)功能間接引起

3、。 目的：探討依托咪酯對(duì)體外培養(yǎng)的健康人外周血單個(gè)核細(xì)胞凋亡及殺傷腫瘤細(xì)細(xì)胞毒效應(yīng)的影響。 方法：選取6名健康志愿者，抽取外周靜脈血肝素抗凝，梯度密度離心法分離采集單個(gè)核細(xì)胞體外培養(yǎng)，分為依托咪酯1、2、3(E1、E2、E3)和空白對(duì)照組，各組依托咪酯終濃度分別為0.5，5，50μg/ml，孵育24小時(shí)后，以Annexin-V/PI熒光探針標(biāo)記、流式細(xì)胞術(shù)分析各組細(xì)胞凋亡情況，并以人紅白血病細(xì)胞系K562瘤細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)株為靶

4、細(xì)胞，以上各組細(xì)胞為效應(yīng)細(xì)胞，設(shè)置效．靶比為20：1。應(yīng)用四甲基偶氮唑鹽(methythiazolvltetrazolium，M TT)比色法檢測(cè)各組單個(gè)核細(xì)胞殺傷K562瘤細(xì)胞來評(píng)估細(xì)胞毒效應(yīng)的大小。結(jié)果：與對(duì)照組比較，0.5、5μg/ml組單個(gè)核細(xì)胞凋亡率差異無顯著性，而50μg/ml組凋亡顯著增加(p<0.01)；0.5、5μg/ml組單個(gè)核細(xì)胞對(duì)K562細(xì)胞毒作用差異無顯著性，而50μg/ml組顯著降低(p=0.02)。