清開靈有效組分對腦缺血損傷神經(jīng)元的保護機制研究.pdf

1、腦缺血的病理生理是一個多環(huán)節(jié)、多因素、多途徑損傷的酶促級聯(lián)反應,西醫(yī)單純干預其中某一環(huán)節(jié)或途徑單一的治療,經(jīng)臨床證實療效甚微.中醫(yī)學具有整體觀念的特點,中藥叉具有復方特征,從研究看其可以作用于多環(huán)節(jié)相關靶點,從而干預腦缺血損傷病理過程.故從中醫(yī)藥尋求防治腦缺血的有效措施和治療藥物,是人們關注的課題.目前中藥腦保護研究多集中在益氣活血、開竅醒神、補益肝腎、化痰通絡等方面,中藥復方制劑的療效沒有明確肯定.通過運用中醫(yī)辨證論治與有效生化指標結

2、合,深入探討腦保護研究的療效問題.前期實驗研究發(fā)現(xiàn),清開靈有效組分主要是黃芩苷、梔子苷、膽酸、珍珠母等,具有解毒通絡、開竅醒神等功效,研究該藥對腦缺血后的神經(jīng)營養(yǎng)因子和神經(jīng)保護因子的影響,探討清開靈有效組分治療腦缺血的療效并闡明其保護機制,為中醫(yī)藥治療腦缺血提供現(xiàn)代科學依據(jù).1研究方法與結果;該實驗參照Longa法,成功復制出大鼠腦缺血模型.將大鼠按缺血兩個時段分為模型組、給藥組(黃芩苷、梔子苷、膽酸、珍珠母及四者配伍合方組)及假手術組

3、,兩個時段為12小時及24小時.除假手術組外,余各組造模前1小時均給藥一次,前期實驗證明各給藥組之間動物模型神經(jīng)功能評分經(jīng)統(tǒng)計學處理無顯著性差異.各藥物治療組分別腹腔注射相應藥物,12小時時段組第二次給藥時,與第一次給藥間隔4小時;24小時時段組第三次給藥時,與第二次給藥間隔12小時.采用酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法(ELISA)原理檢測缺血腦組織bFGF、BDNF、TGF-β和HSP70含量及變化,免疫組化染色觀察了缺血腦組織TrkB、T

4、GF-βRI、TGF-βRⅡ的表達部位.2結論;通過上述結果得出以下結論:(1)腦缺血損傷使血清NSE含量顯著增加,膽酸、珍珠母及四者配伍合方在缺血1 2小時能有效抑制神經(jīng)元NSE的釋放,可以認為膽酸、珍珠母及合方在腦保護中發(fā)揮主要作用.至缺血2 4小時,血清NSE水平?jīng)]有降低.推測清開靈的不同組分對神經(jīng)元的保護作用在12小時和24小時兩個時段作用上有一定差異.(2)在缺血12小時,黃芩苷、膽酸和珍珠母可以誘導許多神經(jīng)營養(yǎng)因子合成增加,

5、其中包括堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)和腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)及其受體TrkB的表達上調(diào).在缺血2 4小時只有黃芩苷增加bFGF和BDNF的表達,從而對神經(jīng)元起保護和營養(yǎng)作用,膽酸和珍珠母則不發(fā)揮作用.(3)黃芩苷、珍珠母及合方在缺血12小時可抑制轉化生長因子-β(TGF-β)的表達,至缺血24小時珍珠母和膽酸則上調(diào)TGF-β,由此推測清開靈有效組分在不同時段其腦保護機制可能不同,且TGF-β在腦缺血不同時期可能發(fā)揮"雙刃劍