鎘暴露對未成年雄性小鼠的生殖毒性研究.pdf

1、目的：探索鎘染毒對未成年雄性小鼠生殖系統(tǒng)的損傷及生育能力的影響,為進一步研究鎘的生殖毒性積累基礎(chǔ)資料。
　　 方法：96只四周齡SPF級雄性NIH小鼠隨機分為正常對照組,低、中、高劑量組,每組24只。按照總劑量分別為0、0.84、1.68、3.36mg Cd/kg體重腹腔注射生理鹽水或氯化鎘(CdCl2)和β-巰基乙醇(ME)的混合溶液(二者濃度比為1∶20),1次/天,連續(xù)5天。給藥結(jié)束后的第30,60,90,120天,各組分

2、別隨機取6只動物,進行如下處理:
　　 1.交配能力檢測:將雌雄小鼠按1∶1合籠,雌鼠放入后,記錄雄鼠首次捕捉雌鼠的時間即捕捉潛伏期及20min內(nèi)雄鼠捕捉雌鼠的次數(shù)。
　　 2.雄鼠生殖毒性檢測:①采血,離心取血清,測定血清睪酮(T)。②解剖取腦、心、肺、肝、脾、腎、睪丸,測臟器系數(shù)。③留取右腎、右睪丸和部分肝,用原子吸收光譜儀(AAS)測定其中的鎘含量。④取右側(cè)附睪觀察精子畸形率。⑤固定肝臟、脾臟、左腎、左睪丸和左附睪

3、進行病理檢查。
　　 3.雌鼠交配率和受孕率檢測:將雄鼠與雌鼠按1∶2合籠,發(fā)現(xiàn)陰道栓當(dāng)天記為妊娠第0天(GD0),合籠12d后計算雌鼠交配率,在GD14,確定成功懷孕雌鼠的數(shù)量,計算受孕率。
　　 4.胎鼠檢測:每組隨機取一半受孕雌鼠,于GD17處死取出胎鼠。進行一般觀察,并測量體長、尾長及體重。再對胎鼠分別進行骨骼畸形和內(nèi)臟畸形檢查。
　　 5.仔鼠檢測:讓每組另一半受孕雌鼠自然分娩,仔鼠21日齡時稱重,并觀

4、察性別。
　　 6.窩平均活胎數(shù)統(tǒng)計:對各批次各組孕鼠的窩平均活胎數(shù)(包括胎鼠和仔鼠)進行統(tǒng)計。
　　 結(jié)果：
　　 1.交配能力檢測結(jié)果:30,60,90,120d批次染鎘雄鼠的交配能力與對照組相比未出現(xiàn)顯著變化。
　　 2.雄鼠生殖毒性檢測結(jié)果:①血清T檢測結(jié)果:30d,60d,120d批次的1.68、3.36mg Cd/kg組雄鼠的血清T含量顯著低于正常對照(P＜0.05),90d批次的所有染鎘雄鼠

5、血清T含量均顯著低于正常對照組(P＜0.05)。②120d批次的0.84mgCd/kg組肝臟、肺臟,1.68mg Cd/kg組肝臟的臟器系數(shù)較正常對照組顯著升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。③臟器鎘含量測定結(jié)果:各批次染鎘雄鼠肝、腎、睪丸鎘含量均顯著高于正常對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。④精子畸形率:各批次染鎘雄鼠精子畸形率與正常對照組相比,均顯著升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。⑤臟器病理檢查結(jié)果:染鎘動物腎臟

6、病理變化主要以間質(zhì)炎細胞浸潤,腎小管上皮細胞變性,慢性腎盂腎炎為主。肝臟的病理改變主要有:局灶性炎細胞浸潤,肝臟髓外造血,肝細胞核腫脹等。脾臟也出現(xiàn)了髓外造血。睪丸的病理改變主要以部分生精小管萎縮,部分動物睪丸組織壞死為主。附睪的病理改變主要有:附睪管內(nèi)精子消失,部分附睪管內(nèi)可見脫落生精細胞。
　　 3.雌鼠交配率和受孕率檢測結(jié)果:各批次染鎘組雌鼠的交配率和受孕率與對照組相比均未出現(xiàn)顯著變化。
　　 4.胎鼠檢測結(jié)果:各

7、批次染鎘組胎鼠的體長、尾長、體重與正常對照組相比未出現(xiàn)顯著變化。120d批次的3.36mg Cd/kg組個別胎鼠出現(xiàn)趾骨骨化不全,頸椎椎體骨化不全或未骨化。所有胎鼠均未發(fā)現(xiàn)內(nèi)臟畸形。
　　 5.仔鼠檢測結(jié)果:120d批次的3.36mg Cd/kg組的仔鼠體重與對照組相比明顯降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。其他批次染鎘組仔鼠體重與正常對照組相比未出現(xiàn)明顯變化,各批次中所有組別的雌性仔鼠占仔鼠總數(shù)的比例均無明顯差異(P＞0.