豬血紅蛋白的脫色及其珠蛋白源ACE抑制肽的研究.pdf

1、選用脫色率和蛋白質(zhì)損失率為指標(biāo),研究活性炭、羧甲基淀粉脫除豬血紅蛋白酶解液色澤的優(yōu)化工藝條件；以珠蛋白水解度為指標(biāo),對胃蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解珠蛋白條件進行優(yōu)化；在酶解優(yōu)化條件下,通過不同水解階段的珠蛋白水解產(chǎn)物對ACE活性抑制率的測定,篩選具有較高ACE抑制活性的珠蛋白源生物活性肽酶解技術(shù)參數(shù)；經(jīng)Sephadex G-25層析分離后獲得珠蛋白源ACE抑制肽。 1.活性炭對豬血紅蛋白酶解液的脫色研究。通過正交試驗,比較研究活性炭

2、用量、pH值、溫度和時間對活性炭脫除豬血紅蛋白酶解液色澤效果的影響。結(jié)果表明：活性炭的用量為1％,pH值為4.0,溫度為80℃,時間為40min時為活性炭脫除豬血紅蛋白色澤的最佳工藝參數(shù),其酶解液脫色率為87.68％,蛋白質(zhì)損失率為37.83％。 2.羧甲基淀粉對豬血紅蛋白酶解液的脫色研究。根據(jù)單因素試驗確定時間為20min,再通過正交試驗,比較研究羧甲基淀粉的用量、pH值和溫度對豬血紅蛋白酶解液脫色效果的影響。結(jié)果表明：在羧甲

3、基淀粉的用量為0.2％,pH值為4.0、溫度為50℃的條件下脫色吸附20min,為羧甲基淀粉處理豬血紅蛋白最佳脫色工藝參數(shù),其酶解液脫色率為84.90％,蛋白質(zhì)損失率為12.29％。 3.用三因素二次旋轉(zhuǎn)試驗與正交試驗分別優(yōu)化胃蛋白酶、木瓜蛋白酶水解珠蛋白的水解條件,測定各酶優(yōu)化水解方式下不同水解階段的水解產(chǎn)物對ACE抑制活性的影響。結(jié)果表明：在胃蛋白酶水解珠蛋白的酶量0.3％,初始pH值2.6,蛋白濃度0.7％,溫度37℃,時

4、間4h時,水解產(chǎn)物對ACE抑制活性最大,抑制率為93.2％；在木瓜蛋白酶水解珠蛋白的酶量為0.7％,初始pH值為5.2,蛋白濃度為0.5％,溫度為56℃,3h時,水解產(chǎn)物對ACE的最大抑制率為90.49％。 4.選擇具有分子篩作用的Sephadex G-25為層析材料對具有較高ACE抑制活性的珠蛋白源活性肽進行分離。在洗脫流速為0.5mL/min時,選用三種不同離子強度的磷酸鹽緩沖液進行洗脫分離。結(jié)果表明：在0.03mol/L離