草珊瑚浸膏在體外對(duì)幽門螺桿菌的抑菌作用及其與抗生素的協(xié)同作用.pdf

1、背景與目的：
　　幽門螺桿菌(H.pylori）的感染和多種胃腸道疾病的發(fā)生密切相關(guān)，有效根除H.pylori對(duì)防治H.pylori相關(guān)性疾病極為重要。目前H.pylori的根除治療有質(zhì)子泵抑制加2種抗生素的三聯(lián)方案和質(zhì)子泵抑制加鉍劑再加2種抗生素的四聯(lián)方案，由于H.pylori對(duì)抗生素的耐藥，這些方案的H.pylori根除率仍不盡人意。為了提高H.pylori的根除率，人們通過延長(zhǎng)療程，增加抗生素劑量，抗菌藥物種類由2種增加到3

2、種（如序貫方案、伴同方案、雜合方案）。那么，隨著H.pylori對(duì)抗生素的耐藥率的逐年增高，這些方案對(duì)H.pylori的根除率是否與三聯(lián)方案一樣逐漸下降到不可接受的水平。因此，人們?cè)噲D從非抗生素途徑尋找治療H.pylori感染的方法，以克服H.pylori對(duì)抗生素耐藥的影響，提高H.pylori根除率，中藥就是其中一種。作為天然中藥的草珊瑚具有抗炎和廣譜抗菌作用，其是否有抗H.pylori作用，目前未見報(bào)道。為此，本文采用瓊脂稀釋法研究

3、了草珊瑚浸膏（sarcandra glabra extract,SGE)對(duì)H.pylori的抑菌作用，同時(shí)觀察了它與我國(guó)第四次幽門螺桿菌感染診治共識(shí)推薦的6種抗生素是否具有協(xié)同作用，尤其是可否降低對(duì)H.pylori耐藥抗生素的最低抑菌濃度（minimum inhibitory concentration,MIC），從而克服H.pylori對(duì)抗生素的耐藥。此外，還觀察了SGE作用H.pylori后細(xì)菌內(nèi)容物的外滲，以探索SGE抗H.pyl

4、ori作用的增加H.pylori對(duì)抗生素敏感性的可能機(jī)制，為SGE用于H.pylori相關(guān)性疾病的治療提供依據(jù)。
　　方法：
　　1、H.pylori菌株：從南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院消化研究所保存的2010年6月～2013年8月期間已-行濃度梯度法（E-test）或紙片擴(kuò)散法（Kirby-Bauer，K-B）藥敏感檢測(cè)的653例H.pylori菌株中，篩選出對(duì)我國(guó)第四次共識(shí)推薦的6種抗生素（A-阿莫西林，C-克拉霉素，M-甲硝唑

5、，L-左氧氟沙星，T-四環(huán)素和F-呋喃唑酮）中，至少對(duì)其中一種耐藥的H. pylori32株，其中對(duì)3種及3種以上抗生素耐藥的有8株，對(duì)2種抗生素耐藥的有16株，對(duì)1種抗生素耐藥的有8株。
　　2、瓊脂二倍稀釋法驗(yàn)證上述32株H.pylori的最小抑菌濃度（minimalinhibitory concentration，MIC）。
　　3、瓊脂二倍稀釋法檢測(cè)SGE對(duì)上述32株H.pylori的MIC。
　　4、草珊瑚與

6、6種抗生素的聯(lián)合效應(yīng)：遵照CLSI細(xì)菌藥敏實(shí)驗(yàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)，按照棋盤法設(shè)計(jì)組合系列不同濃度的兩種抗菌藥物，用瓊脂平板法測(cè)定6種抗菌藥物在單用和與SGE聯(lián)用時(shí)的MIC。計(jì)算部分抑菌濃度指數(shù)（fractional inhibitory concentration index，F(xiàn)ICI）以評(píng)估藥物之間的聯(lián)合效應(yīng)。當(dāng)FICI≤0.5為協(xié)同作用，0.52為拮抗作用。
　　5、SGE

7、對(duì)H.pylori外膜屏障功能的影響：分別選取多重耐藥和對(duì)6種抗菌藥物均敏感菌株的H.pylori各1株，與95μg/mL的SGE溶液作用24h后取上清液測(cè)其中葡萄糖含量及天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性，以判定細(xì)菌內(nèi)容物滲漏情況，每株菌重復(fù)2次。
　　結(jié)果：
　　1、SGE對(duì)32株H.pylori的MIC分布在11.9～47.5μg/mL之間。
　　2、SGE與6種抗生素之間的聯(lián)合效應(yīng)：①SGE+A：FICI≤0.5(80％

8、)，0.5＜FICI≤1(20%)；②SGE+M：FICI≤0.5(70%)，0.5＜FICI≤1(30%)；③SGE+L：FICI≤0.5(60%)，0.5＜FICI≤1(40%)；④SGE+F：FICI≤0.5(90%)，0.5＜FICI≤1(10%)；⑤SGE+T：FICI≤0.5(90%)，0.5＜FICI≤1(10%)；⑥SGE+C：FICI≤0.5(80%)，0.5＜FICI≤1(20%)。
　　3、無(wú)論是對(duì)抗菌藥物耐

9、藥株還是敏感株，95μg/mL的SGE與其作用24h后，上清液中AST和Glu含量與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01），SGE組的AST和GLU含量顯著高于對(duì)照組。表明SGE可破壞H.pylori的外膜屏障功能。
　　結(jié)論：
　　1、SGE體外對(duì)耐藥H.pylori菌株有明顯的抑制效果。
　　2、SGE與6種抗生素聯(lián)合對(duì)耐藥H.pylori菌株的體外聯(lián)合效應(yīng)表現(xiàn)為協(xié)同和相加作用，且以協(xié)同作用為主。
　　3、S