海馬微血管構(gòu)筑及衰老變化的定量研究.pdf

1、目的：應(yīng)用乳膠色素鑄型法和單寧酸—氯化鐵(TA-FE)媒染微血管法，探討大鼠海馬的血供來(lái)源，定量分析海馬與額葉皮質(zhì)的微血管構(gòu)筑及衰老變化，為臨床血管性癡呆的預(yù)防和治療提供形態(tài)學(xué)資料。 方法：選用健康SD大鼠30只，其中青齡鼠15只，月齡4～6月；老齡鼠15只，月齡24～26月。分別采用乳膠色素鑄型法和單寧酸—氯化鐵(TA-FE)媒染微血管法觀察海馬血供來(lái)源及海馬與額葉皮質(zhì)的微血管構(gòu)筑。1乳膠色素鑄型法：隨機(jī)選取青齡鼠、老齡鼠各5

2、只。從一側(cè)頸總動(dòng)脈加壓注入乳膠加朱紅的混合物，12小時(shí)后取腦，手術(shù)顯微鏡下追蹤海馬的血供來(lái)源。 2單寧酸—氯化鐵媒染法：選取青齡鼠、老齡鼠各10只。大鼠腹腔麻醉、溫鹽水快速?zèng)_洗血管后，用0.1MPB、4％多聚甲醛和10％單寧酸混合媒染固定液250ml灌流固定。4小時(shí)后取腦，Leica振蕩切片機(jī)連續(xù)冠狀切片，片厚50μm，2％氯化鐵溶液呈色，蒸餾水漂洗、梯度酒精脫水、二甲苯透明、中性樹(shù)膠封片，光學(xué)顯微鏡下觀察。采用MiVnt圖像分

3、析系統(tǒng)對(duì)各組大鼠海馬和額葉皮質(zhì)的微血管密度(MVD)及微血管面積密度(MVA)進(jìn)行定量分析：每例標(biāo)本于海馬水平部平面隨機(jī)選取3張切片、海馬垂直部平面選取3張切片，在海馬水平部和垂直部按海馬分區(qū)分別各選一個(gè)視野；在大腦皮質(zhì)額葉隨機(jī)選3個(gè)視野。所得數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)分析軟件以t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。 結(jié)果：1海馬血供來(lái)源：大鼠的腦底動(dòng)脈環(huán)，由兩側(cè)頸內(nèi)動(dòng)脈顱底段，大腦前、后動(dòng)脈起始段，總前大腦動(dòng)脈，后交通動(dòng)脈和基底動(dòng)脈末端吻合而

4、成。海馬水平部由脈絡(luò)膜動(dòng)脈營(yíng)養(yǎng)，脈絡(luò)膜動(dòng)脈由頸內(nèi)動(dòng)脈腦底段發(fā)出，從海馬裂進(jìn)入海馬；海馬垂直部由大腦后動(dòng)脈營(yíng)養(yǎng)，大腦后動(dòng)脈由頸內(nèi)動(dòng)脈腦底段發(fā)出，再垂直發(fā)出10數(shù)支小動(dòng)脈從海馬裂進(jìn)入海馬。 2青齡大鼠的微血管：(1)微血管的特點(diǎn)：光鏡下觀察，額葉皮質(zhì)的微血管從腦表面垂直進(jìn)入腦實(shí)質(zhì)，呈樹(shù)枝狀分支并相互吻合成網(wǎng)。脈絡(luò)膜動(dòng)脈進(jìn)入海馬裂后分出數(shù)支橫行動(dòng)脈，再由橫行動(dòng)脈發(fā)出分支，呈扇形分布于海馬裂兩側(cè)的海馬水平部各區(qū)。由大腦后動(dòng)脈發(fā)出10數(shù)支

5、小動(dòng)脈進(jìn)入海馬裂后，發(fā)出分支分布于海馬的垂直部。(2)定量分析結(jié)果：海馬水平部MVD為0.109±0.004，垂直部MVD為0.126±0.016，二者有顯著性差異(P＜0.05)。海馬MVD為0.118±0.008，額葉皮質(zhì)MVD為0.187±0.014，二者有顯著性差異(P＜0.01)。海馬水平部MVA為12.34±0.96，垂直部MVA為13.72±0.49，二者有顯著性差異(P＜0.01)。海馬MVA為13.03±0.47，額葉

6、皮質(zhì)MVA為19.69±2.97，二者有顯著性差異(P＜0.01)。 3老齡大鼠的微血管：(1)微血管的特點(diǎn)：腦表面的小動(dòng)脈迂曲變長(zhǎng)，呈動(dòng)脈硬化樣表現(xiàn)。光鏡下可見(jiàn)，垂直進(jìn)入腦實(shí)質(zhì)的小動(dòng)脈多數(shù)扭曲變形，部分呈串珠樣改變。微血管數(shù)量顯著減少、分布雜亂、扭曲纏結(jié)。此變化尤以海馬更為明顯。(2)老齡大鼠定量分析結(jié)果：老齡大鼠海馬水平部MVD為0.057±0.005，垂直部MVD為0.069±0.014，二者無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。

7、老齡大鼠海馬MVD為0.063±0.005，額葉皮質(zhì)MVD為0.098±0.010，二者有顯著性差異(P＜0.01)。老齡大鼠海馬水平部MVA為7.71±0.39，垂直部MVA為8.64±0.91，二者有顯著性差異(P＜0.01)。老齡大鼠海馬MVA為8.17±0.32，額葉皮質(zhì)MVA為12.24±1.12，二者有顯著性差異(P＜0.01)。(3)青齡大鼠與老齡大鼠比較：青齡大鼠海馬MVD為0.118±0.008，老齡大鼠海馬MVD為0

8、.063±0.005，二者有顯著性差異(P＜0.01)。青齡大鼠額葉皮質(zhì)MVD為0.187±0.014，老齡大鼠額葉皮質(zhì)MVD為0.098±0.010，二者有顯著性差異(P＜0.01)。青齡大鼠海馬MVA為13.03±0.47，老齡大鼠海馬MVA為8.17±0.32，二者有顯著性差異(P＜0.01)。青齡大鼠額葉皮質(zhì)MVA為19.69±2.97，老齡大鼠額葉皮質(zhì)為12.24±1.12，二者有顯著性差異。 結(jié)論：1大鼠海馬水平部?jī)H